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泽泻高效液相色谱法检测

jhjs

2015/08/28

中药/天然药检测

泽泻高效液相色谱法检测

药材泽泻为泽泻科植物泽泻的干燥块茎。与其它药材不同的是它是冬季茎叶开始枯萎时采挖，然后洗净，干燥，除去须根和粗皮，长的非常像土豆，这就是泽泻药材。

该植物早期有人把它叫做泽芝、水泻、鹄泻、及泻等，多生长在沼泽边缘，故而得名。因它花较大，白色艳丽，花期较长，有人常在家中或庭院中作为花卉养殖观赏。
全株有毒，地下块茎毒性较大。性寒，味微苦，可入药，具有利水、渗湿、泄热、化浊降脂、降低血清总胆固醇、减缓动脉粥样硬化形成等功效。主治肾炎水肿、肠炎泻痢、痰饮眩晕、遗精尿血、小便不利、高脂血症、脂肪肝及糖尿病等病症。
下面我们用高效液相色谱法检测泽泻中主要药物成分23-乙酰泽泻醇B含量。
【实验部分】
【原理】
精密称取适量泽泻样品经乙腈溶解，超声提取后注入高效液相色谱系统，C18色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法（保留时间定性，峰面积定量）计算，得出泽泻中23-乙酰泽泻醇B含量。
【仪器及试剂】
仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器+高压泵+柱温箱等），超声波清洗仪，溶剂过滤器，电子天平（0.001），五号筛（药典筛）等。
试剂：乙腈（色谱纯），超纯水等。
【样品溶液制备】
对照品溶液制备：精密称取23-乙酰泽泻醇B对照品1mg于50ml容量瓶中，加乙腈溶解定容，制成20μg/ml 23-乙酰泽泻醇B对照品溶液，备用。
供试品溶液制备：取样品泽泻适量，充分粉碎后过药典筛五号筛，精密称取过筛粉末0.5g置于具塞锥形瓶中，精密加入乙腈25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟后，放冷，再次称定重量，用乙腈补足减少的重量，摇匀，0.45μm有机相微膜滤过，待测。
【色谱条件】
检测器：紫外检测器
检测波长：208nm
色谱柱：Promosil C18 ( 250 mm X 4.6mm，5μm )
流动相：乙腈：水=73：27（V：V)
流速：1.0ml/min
柱温：30℃
进样量：10μl
【色谱图】
对照品溶液色谱图：

供试品溶液色谱图：

【计算】
样品中被测物含量计算公式：

D----供试品中被测物百分含量，以（%）表示
V----供试品稀释的总体积，单位（mL）
P3----供试品中被测物峰面积值
P4-----对照品中被测物峰面积值
ρ2----对照品被测物浓度。单位为mg/ml
M2----样品质量，单位（mg）

【结果】

通过以上公式计算，泽泻中23-乙酰泽泻醇B的含量近似为0.058%，高于药典要求的不小于0.05%，该泽泻中23-乙酰泽泻醇B含量符合药典要求，该检测项目合格。
【结论】
以上方法检测泽泻中23-乙酰泽泻醇B含量，虽然样品中干扰物较多，一定程度上影响了供试品色谱图的效果，对实验结果有微弱的影响（可能和实验室温度、风度等因素有关，由于实验室条件有限，没做该方面验证），但总体来说该方法较方便、快捷，结果准确、可靠，操作简单、易行，该方法适合该类样品检测。

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土老冒豆豆

第1楼2015/08/28

应助达人

可惜有毒，不能当土豆那么做食物来吃。

0

jhjs

第2楼2015/08/28

少量对症是药，多了或不对症是毒
土老冒豆豆(土老冒豆豆) 发表:可惜有毒，不能当土豆那么做食物来吃。

0

吕梁山

第3楼2015/08/30

这个方法和药典方法一样吗？

0

jhjs

第4楼2015/08/30

参照药典，不完全一样
吕梁山(shih20j07) 发表:这个方法和药典方法一样吗？

0

吕梁山

第5楼2015/09/05

说说与药典的不同之处

0

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