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实验室操作的六不

微信Lab_Map

2015/10/13

液相色谱（LC）

2015-10-13 实验室Map

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本期分享一下液相操作中的经验之谈，暂且成为“实验室操作中的六不”

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1不能测有机溶剂的pH值
配置缓冲盐无怪乎有三种方式：正确的，简单的，错误的
例如：配置1L20mM，pH为4.0 的乙酸铵缓冲盐，正确的做法是：通过缓冲盐的计算，算出要称多少乙酸和乙酸铵，提供一个在线的网站http://www.zirchrom.com/Buffer.asp
简单的做法就是先配置1L20mM的乙酸铵，然后再用乙酸调整至pH 4.0，这样做的话，最后缓冲盐的浓度就不是准确的20mM
错误的做法就是将缓冲盐和有机溶剂（甲醇或乙腈）混合后，再测定pH值，这样的话，pH很容易受到温度的影响，所以尽量避免这种情况
2不要同一根柱子测试多个方法
这种情况是不是会经常遇到？是否考虑过不同方法之间的干扰？样品的残留和基质的干扰都会造成不可预估的影响，所以如何可以，尽可能的做到一个方法配一根柱子
3不要用一根用过的柱子开发新方法
这可是血和泪的教训，考虑到柱子很贵，不愿意购买新的柱子，在开发新方法的时候就选择了一根用过的柱子，然后呢？出现了各种情况：峰形差的，不出峰的，出鬼峰，不知道浪费了多少时间，最后才发现是柱子的问题，所以务必在开发新方法的时候，用一根新柱子
4不要相信所有的C18的柱子都是一样的
同样规格，同样填料的柱子，生产商不一样，柱子间的选择性还是有差别的
即使是同一生产商，还有可能是不一样

5不要忽略了溶剂过滤头
众所周知，缓冲盐是微生物滋生的天堂，尤其是放在阳光下，那些微生物更是疯狂的生长，所以在实验室里，缓冲盐都放在棕色瓶里避光，同时定时去更换新的batch，那么溶剂过滤头呢？
微生物都会富集在滤头上，如果不清洗干净，即使是更换了新的缓冲盐，也会被污染的，所以要在更换缓冲盐的时候，尽可能去清洗干净过滤头
6不要忽略了其它成本
滤头脏了，超声清洗，重复利用；柱子堵了，反冲，重复利用，当我们以为是节省了成本的时候，是否考虑过清洗用的溶剂是有成本的，占用的时间是有时间成本的，占用的人力是有人力成本的，还有风险成本呢（如果不成呢？）
所以是更换新的还是重复利用，要考虑清楚
导语

分
该帖子已被版主-20071940xu加2积分，加2经验;加分理由:鼓励发帖

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夏天的雪

第1楼2015/11/30

应助达人

虽然只有六不，但是好几条都没有做到

0

支点

第2楼2015/12/01

应助达人

挺好的东西也是应该注意的东西，但现实中真的有些经常被忽略，尽量做到吧。

0

hujiangtao

第3楼2015/12/01

应助达人

确实C18的柱子差别也是很大的

0

yzx2011

第4楼2015/12/27

应助达人

那我用安捷伦的柱子是不在更换智能用他们家的

0

浪淘沙隐

第5楼2015/12/28

第三条不能完全认同，哪有那么多新柱子。

0

夏天的雪

第6楼2015/12/28

应助达人

这个可能只能针对偶尔开发新方法，或者平时项目比较少的用户
浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:第三条不能完全认同，哪有那么多新柱子。

0

nixiaolong

第7楼2015/12/29

有时候领导不理解，买那么多柱子干嘛？所以一根色谱柱不得不测定多种方法

0

浪淘沙隐

第8楼2015/12/29

个人认为，普通的流动相，根本不会对色谱柱造成影响，能对色谱柱造成影响的一般是离子对试剂。至于楼主提到的，可能在开发方法时，柱效什么的不行，这个完全可以通过色谱柱的管理来避免。总之，不可能做到都用新柱子开发方法，否则会造成巨大的浪费。
夏天的雪(bingwang228) 发表: 这个可能只能针对偶尔开发新方法，或者平时项目比较少的用户

0

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