[求助]：请教：峰很宽，上面有很多小毛刺？？？？？？

看了你的色谱图，建议给出你的液相条件。这样方便大家帮你分析。
初步看需要改善你的液相条件。

液相条件：流动相：甲醇（0.1％甲酸，4mM甲酸胺），水（0.1％甲酸，4mM甲酸胺）。梯度条件：0-0.5min（2％甲醇），0.5-1.8min，（2％甲醇增加到98％），1.8-3.5min（98％甲醇），3.5-3.6min（98%甲醇降倒2％），3.6-5min（2％甲醇）平衡柱子。流速：0.2ml/min，柱子为2.1×50mm。

建议加大流速为0.3或0.4mL/min,或者换根长一点的柱子，如果柱子不变，流速不变，建议平衡的时间拉长，一般平衡的时间应该满足6-15个柱体积。

流动相不是新配的？觉得灵敏度下降了。梯度变化太大了点，看样子在柱子上的保留不好，应该换个合适当柱子，要是仍然用这个柱子用梯度可能意义不大吧。

流速调大了，还是这样，看来要换柱子了。关于柱子，大家能不能给点建议。该换成什么样的柱子呢。多谢！

一般平衡的时间应该满足6-15个柱体积。 和平衡时间有什么关系？

关于柱子，建议用4.6×150mm的柱子，或者2.1×100mm的柱子。
关于平衡应满足6-15个柱体积，这就要求平衡时间足够长。2.1×50mm的柱子，0.2ml/min的流速至少得平衡4分钟。

多谢梁老师，我去试试看

原来我们机器上的cone坏了，换了一个新的就好了