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氨基酸自动分析仪L-8900泵压和结果的问题,求助

生命科学仪器综合讨论

  • 各位老师好,我最近在做鱼肉中的氨基酸分析,现在遇到问题,想请教各位,谢谢~
    现在仪器在0.35ml/min走R3的时候,泵压是0.2-0.3mpa,但是走R1和R2的时候,泵压就会上升到1.9-2.3mpa,而且随着我进样,泵压还会上升,不知道是不是我R1和R2的问题,想问下各位用的流动相药品都是哪个厂家的。
    另外在我上机的过程中,同一批处理的样品会出现前个别样品的前几个峰出不完全,个别样品的峰又可以出完全,具体结果如图:

    这个是可以出峰完全的

    像这个样品的前几个峰就出不完全,
    这是同一批次样品,相同处理,相同条件上机下做的,想请各位老师帮忙看看,是我前处理的那个部分有问题了,各位有没遇到过类似的问题,谢谢大家
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  • tianru的爸爸

    第1楼2016/02/25

    出峰完全?不懂。
    是几个峰的分离度不够的意思吗?第二张图的前面有四个峰没有基线分离。

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  • 豆豆QQ

    第2楼2016/02/26

    是的,是这个意思,老师您遇到过这种问题吗?怎么解决呢?
    我现在还遇到一个问题了,就是泵2的泵压一直在上升,我也尝试换流动相,还是不行。

    tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:出峰完全?不懂。
    是几个峰的分离度不够的意思吗?第二张图的前面有四个峰没有基线分离。

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  • tianru的爸爸

    第3楼2016/02/28

    没用过该仪器。

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  • tianru的爸爸

    第4楼2016/02/28

    这类仪器基本原理应该是反相HPLC。
    如果只有其中某一组峰分离度不够,或者变差,就比较奇怪。
    最好仔细研究一下,流动相,以及梯度。
    因为一般来说,如果分离度变差会全部如此。

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  • ld321

    第5楼2016/03/04

    这个很简单:
    1、R3的压力当然比R1R2低!要是高就出问题了!
    2、随着你进样个数的增多,你这么跑下去,泵压力要是不高就不正常了!别找试剂的问题了!先老老实实的去看标准吧!
    3、解决压力升高的问题,请参考2中给的建议!参考标准,好好查查没分开的峰水解的时间酸浓度等是否真的一致!
    (论坛里,之前看到一篇测氨基酸的原创,他无比坚信他的样品前处理方法很牛逼,讲真,他那真的一点都不牛逼!有网友质疑,他还牛逼哄哄反驳,看他那么牛逼,我都懒得回他,让他继续错下去好啦!)
    4、说到重点,你第二个图不是出峰不完全,是你样品没处理好(样品没处理好,导致压力升高!),再重新处理一次样品吧!


    5、这类问题,还是直接咨询厂家吧,论坛里测氨基酸的很少,要不然也不至于一篇样品前处理都错了的文章还能获奖?

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  • ld321

    第6楼2016/03/04

    第二个没分好的图,这个样品,就是调个1年,都不可能调好,是他样品没处理好,与仪器、分析程序、分离柱一毛钱关系都木有。

    tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:这类仪器基本原理应该是反相HPLC。
    如果只有其中某一组峰分离度不够,或者变差,就比较奇怪。
    最好仔细研究一下,流动相,以及梯度。
    因为一般来说,如果分离度变差会全部如此。

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  • ld321

    第7楼2016/03/04

    换什么试剂也解决不了压力升高的问题!
    按照标准好好处理样品,然后,不用换试剂,压力就不会升高了!

    豆豆QQ(v3066670) 发表: 是的,是这个意思,老师您遇到过这种问题吗?怎么解决呢?
    我现在还遇到一个问题了,就是泵2的泵压一直在上升,我也尝试换流动相,还是不行。

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  • 豆豆QQ

    第8楼2016/03/14

    谢谢老师,后来我反复更换流动相,发现都不行,最后发现是我管路脏了,用水和甲醇反复清洗,后来泵压就下来了。峰分离的不好,应该是我前处理的过程中盐酸在蒸干的过程中没有蒸干,导致样品的酸浓度偏高,峰分离不好~~谢谢您

    ld321(ld321) 发表: 换什么试剂也解决不了压力升高的问题!
    按照标准好好处理样品,然后,不用换试剂,压力就不会升高了!

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  • ld321

    第9楼2016/03/24

    就说么,跟试剂没关系,您还反复更换试剂,要是木有看不出问题所在,会这么肯定的告诉您与试剂没关系吗?会直接告诉您样品要按照标准来处理吗?

    豆豆QQ(v3066670) 发表: 谢谢老师,后来我反复更换流动相,发现都不行,最后发现是我管路脏了,用水和甲醇反复清洗,后来泵压就下来了。峰分离的不好,应该是我前处理的过程中盐酸在蒸干的过程中没有蒸干,导致样品的酸浓度偏高,峰分离不好~~谢谢您

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