仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

【液相色谱之家】微聊ABC,交流又学习(不要回复)

  • 一片枫叶
    2016/03/01
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 微聊0301——流动相过滤与超声 来自群友:微聊ABC


    微A
    :流动相你们都会过滤超声吗?
    微B:高浓度盐过滤,水和其它的多超声会。
    微A:只超声不过滤?
    微B:有机相就不管了,我们水不过滤,因为都接超纯水,出来就是过滤过的,超声脱脱气。
    微A:以前我们流动相都过滤超声的就只有盐才过滤?
    微B:我们高浓度才过滤,主要嫌麻烦,应该都过滤,这样滤头可以用得时间长些。特别是样品溶液,我们都要求过滤。
    微C:任何经过色谱系统的流动相都要经过0.45um以下的微膜过滤,除了一些色谱级的溶剂可以不过滤,其它的都要过滤。
    这个0.45是根据色谱柱填料的硅胶粒径算出来的,如果粒径小于5um,那就要用0.22um的滤膜了。
    微A:具体什么原理?
    微C:不是所有有机相都是色谱纯的,进口试剂都用0.22um滤膜过滤的。5um 的柱子。指的是粒径的平均值是5um,但也存在2um—10um的粒径,所以颗粒间有间隙,这个经过计算就用0.45um比较合适。确切地说也不是算出来的,0.45um是固液分界线0.22um是微生物。
    微B[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp]液质和超高压液相都要用0.22um的滤膜过滤,我们一般都用0.45um的,加一个内衬管,过出来100微升样液,有的看着很干净但过不动。
    微C:购买gersterl 全自动处理平台,其实离心也挺好的,离心好用,过滤有时候会带来干扰。
    微B:加个在线过滤器,问题少很多,老外喜欢加预柱,为了保护色谱柱。
    微C:好多预柱贵死人,预柱多了也是钱,算起来真不如卖好东西。其实离心蛮好的,不过可能需要做验证。

    =======================================================================


    ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~



    合集:【微群集锦】液相色谱之家经验话吧
    链接:http://bbs.instrument.com.cn/topic/6113029_1
    +关注 私聊
  • 一片枫叶

    第1楼2016/03/02

    应助达人

    微聊0302 洗液怎么配制 来自群友:微聊ABC
    微A
    :问一下LC的洗液怎么配制?
    微B:洗针的我一般用70%的甲醇,但有时候会根据样品调整,不接吸滤头。
    sael wash 用5%的甲醇水溶液,还要接吸滤头。
    微C:sael wash 一般用10%的异丙醇,如果盐多直接用纯水洗。
    洗针流动相或者样品空白溶液,洗泵异丙醇水比较好,甲醇有毒,不过异丙醇洗有湍流进仪器。

0
    +关注 私聊
  • zyl3367898

    第2楼2016/03/02

    应助达人

    一片枫叶整理得不错,看起来整齐多了。

0
    +关注 私聊
  • 一片枫叶

    第3楼2016/03/02

    应助达人

    感谢张老师鼓励!
    微聊0303——色谱峰分离与色谱柱压力 来自群友:微聊ABC
    微A:如何判断哪个流动相更合适——分别用两种流动相跑同一个样品,跑出来的结果保留时间峰面积都不一样,有没有一个合适的判断标准?
    微B:出峰快,分离好,响应高,峰宽小,分离效果好。
    微C:分离度≥2.0,拖尾因子:0.95~1.05,这是农业部报证产品分析指标的技术要求。
    微A:我想问一下:一般液相和色谱柱的耐压最大能承受多少?
    微B:常规液相色谱仪耐压400bar到600bar,正常做液相时,基本上控制在200bar内。常规色谱柱一般都是5um的粒径,柱子压力都在250bar以内。如默克的常规色谱柱耐压:不大于250bar。当然,超高压液相耐压会更高,适用于超高压液相的短柱耐压会更高一些,超高压液相色谱短柱的粒径:在3um以下,还有粒径1.7um的短柱。粒径2.7um的短柱,工作压力450bar左右。
    微C:柱子的说明书上一般都有最大承受压力,常规C18,5um,甲醇水不含盐1000psi左右为正常压力。如果要想柱压低,尽量用甲醇。默克的色谱柱耐压:不大于250bar。
    微A:压力太大会把柱子冲坏吗?
    微B:在色谱柱耐压值以内,柱子是不会冲坏的,柱子怕的是撞击和压力的突然变化,压力太大当然会把柱子冲坏,可以根据情况调整流动相的配比和流速,正常做液相柱压控制在200bar以内。长时间超过200bar柱效会下降。

    zyl3367898(zyl3367898) 发表:一片枫叶整理得不错,看起来整齐多了。

0
    +关注 私聊
  • 一片枫叶

    第5楼2016/03/04

    应助达人

    微聊0304.3——液相跑甲醇水时,基线上下有规则的波动 来自群友:微聊ABC


    微A
    液相跑甲醇水时,基线上下有规则的波动,用乙腈水没有问题,改用甲醇水就不行了。
    微B:规律特别明显的考虑一下泵是否不稳定,基本无规律考虑一下检测器,压力稳吗?
    微A:压力还可以,比较稳定,每个泵单独跑基线就正常,两个泵一起跑甲醇水就不正常,不像检测器的问题。
    微B:建议两相用纯有机相冲洗,实在稳定不了,再坼开维护。有时候温度不稳也会出现混合不好的现象,
    微B:梯度混合产生气泡不稳定,为了防止检测器进气泡,检测器后加背压,使检测器前后压差相差不多基线更稳定。
    下图为两种背压管

    背压管与仪器的连接:用氟隆管连接,一端连检测器出口,一端连废液。主要是液相梯度,担心检测器进气泡。

    当然,方法有很多,效果能达到就好,你也可以增加废液管的长度或用较细的废液管,但要考虑流通池的耐压。
    微C:有一点要注意:不要随意增加或剪短检测器配置的废液特氟隆管的。

0
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...