药典内标法的计算问题

应助达人

调节pH值的盐酸和氢氧化钠的浓度一样，因此调节到中性时应该是稀释了一倍，而且用到内标，所以就不用考虑这个稀释倍数了

1。校正因子：f=(3242.9/12.1)/(2581.8/10)=1.0381（个人理解为质量而非药典中所指的浓度，因为峰面积是和具体进样到仪器内的质量相关。即100ml标样溶液中的甘露糖质量为10mg，内标盐酸氨基葡萄糖质量为12.1mg）——————这句话是不对的，药典公式的浓度，都是代表同一体系的，也就是说在100ml标样中，甘露糖：10mg/100ml，内标12.1mg/100ml，用这二个计算。。你不要偷换概念，有时会出错。一般的色谱都是基于浓度与峰面积成正比为基础来讨论的。
2。关于稀释，我们就按简单的理解就可以，不要想复杂了， 在0.12g样品 2ml的内标体系中，适用校正因子，不管后面怎么处理， 样品溶液中，样品和内标的浓度比永远是 0.12g/?ml :24.2mg/?ml。 就好理解药典的含量（Cx）公式了。

同意楼上。

感谢您的回复并参与讨论。
我同意您的观点“药典公式的浓度，都是代表同一体系的”。我在这里并不是偷换概念，在我的第二个方法里面就是采用浓度的办法，实际上就是要计算出？ml中的甘露糖的浓度，但是计算出来的这个浓度需要用到体积来换算到药材中甘露糖的含量%或者mg/g。而这个体积事实上是不确定的，我在操作中就是使用一个烧杯，按照烧杯的100ml刻度线来确定体积。所以我觉得这里采用质量的办法更简单也直观，就是计算出来这个约100ml溶液中甘露糖的总质量就行了。
我不解的是，一般内标法都是采用恒定的内标浓度或者内标量来校正。但是这里在100ml标样溶液中加的是1ml内标，而100ml样品溶液中加的是2ml内标。而这2ml的内标因为水解稀释也变成了约1ml，这会最终影响到计算结果吗？
或者说这其中的f是个常量？在相同的仪器、试剂、溶液等系统体系下，无论加入内标液的浓度是多少，任何时候（A内标/m内标）/（A甘露糖/m甘露糖）都近似于常数？是不是这么理解之后，无论实验过程如何变化，只要准确的加入内标，就能够校正出甘露糖的量？

谢谢您的回复。
我不解的是，一般内标法都是采用恒定的内标浓度或者内标量来校正。但是这里在100ml标样溶液中加的是1ml内标，而100ml样品溶液中加的是2ml内标。而这2ml的内标因为水解稀释也变成了约1ml，这会最终影响到计算结果吗？

或者说这其中的f是个常量？在相同的仪器、试剂、溶液等系统体系下，无论加入内标液的浓度是多少，任何时候（A内标/m内标）/（A甘露糖/m甘露糖）都近似于常数？是不是这么理解之后，无论实验过程如何变化，只要准确的加入内标，就能够校正出甘露糖的量？

谢谢参与

f 值是这样理解的 ，理论上在同一环境下的实验f值是不变的，内标测试的原理也在于此。
还有一点，方法说补足溶液至100ml，这是个很广的概念，要看你怎么设计实验才能让他变得更准确。你用100ml烧杯显然不太好。至少你可以精密加水后称重，最后补足也称重，这是比较常规的补足法。那么还是挺准确的。

有时吧，写方法的人也并不是那么专业的。 在细节上的考虑也会缺失经验的。
还有楼主，不管怎样你都不能以质量代替浓度。。质量不成比例的，除非设计的实验稀释倍数是一样的。。你如果有这种概念，很多时候会出错。

谢谢！确实标准的原文中是说“放冷，加水补至约100ml”，我个人觉得这个“约”字应该不是随便写出来的。不过通过您的回复我已经能想明白了。
关于您提到不能使用质量来计算的问题，我也有点困惑。我在计算及标准曲线的制作中都是使用m质量（mg/ug/ng）-对应吸光度或者峰面积A来制作标准曲线，（举个例子：绿原酸标样浓度0.1mg/ml，进样10ul，得峰面积500，我的计算法就是进绿原酸质量为0.1mg/ml×10ul=1ug，意思就是进1ug的绿原酸其对应峰面积是500）。但我不知道这样做有什么不妥之处，不知道您是否方便举个例子来说明一下我这样计算的缺陷。非常感谢！