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关于液相方法开发和优化

seannoy

2016/05/19

液相色谱（LC）

简单和大家交流下在液相方法建立过程中的一些看法，希望大家多多批评指正！
1 检索整理目标物的理化特征，重点关注极性、溶解性、稳定性和是否具有氨基、酸根等重点关注的官能团等，分子量和空间结构要了解；
2 确定目标物是否具有紫外吸收和荧光响应，特殊的要考虑蒸发光、示差，若单独物质无法检测，应考虑衍生等方式；
3 根据目标物或目标物产物选择色谱柱和流动相，常规选择高比例水和C18，以出峰为主要目的，在根据峰型调整流动相类型、比例，进行色谱条件优化；考虑过膜对目标物的影响；选择色谱柱时应根据分子量和空间结构选择孔径，避免小孔径跑大分子量物质出现不出峰现象。
4 明确样品基质，考虑可能存在的杂质，根据目标物的性质选择提取溶剂，之初可简单净化或不净化，采用样品加标和提取液加标确定是否存在干扰，调整色谱洗脱条件，判断杂质和目标物的分离情况；
5 若存在影响，考虑简单净化（LLE），再考虑分散固相萃取和固相萃取，应用提取溶剂加标先行试验回收，在用样品提取液加标试验回收；
6 进行样品加标，提取净化试验
7 方法建立和验证

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Gogo_Kuo

第1楼2016/05/19

支持了，原理看着有点无趣，希望能举例说明就更好了！

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Gogo_Kuo

第2楼2016/05/19

支持了，原理看着有点无趣，希望能举例说明就更好了！

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