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【农残检测之家】有做过HPLC测定蛋白质类的么?流动相是不是要用到缓冲盐?原理是什么?[冷汗]

  • 元宵爱元宵
    2016/07/30
  • 私聊

农残检测

  • 问题:请问大家。。有做过HPLC测定蛋白质类的么?流动相是不是要用到缓冲盐?原理是什么?
    +关注 私聊
  • zyl3367898

    第1楼2016/07/30

    应助达人

    GE的Superdex 75 5/150的柱子,设定柱温25?,接在HPLC上后,用含25 mM的磷酸盐,200 mM的NaCl,pH 7的缓冲液做流动相,平衡3-5个柱体积至紫外和压力基线稳定,先后进样标准品和样品,得到各自的保留体积。对标准蛋白的分子量求对数,与保留体积进行一次线性回归得到方程,再代入待测样品的保留体积求得其分子量的对数,再求反对数即得。注:buffer的pH应远离目标蛋白的PI2个单位,防止沉淀

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