偶氮甲酰胺检测的注意事项

应助达人

二
检测方法的建立及注意事项
1、前处理
　　取1g小麦粉至10mL离心管，加入5mL丙酮，摇床200r/min，震摇20min，离心取上清液2ml至另一10ml带刻度离心管，加入1mL5%DMSO溶液，40℃氮吹至液体体积＜1mL，加入5%DMSO溶液至1mL，再加入1mL正己烷，摇床100r/min，40℃震摇20min，离心，弃正己烷层，过滤，待上机。
2、色谱条件
　　1）色谱柱：ZORBAX SB-CN 250mm*4.6mm*5μm（安捷伦）
　　2）流动相：5% (V:V)DMSO，流速1.0ml/min
　　3）检测波长：245nm
3、应注意问题
　　1）偶氮甲酰胺在C18色谱柱上几乎没有保留，曾尝试在流动相中添加庚烷磺酸钠、十二烷基磺酸钠等离子对试剂，都无法延迟其出峰时间。因此采用对极性物质有一定保留的氰基柱作为分析柱，其保留时间约4.0～4.5 min，满足分析需要。
　　2）偶氮甲酰胺极性较强，易溶于二甲亚砜和N，N-二甲基甲酰胺，微溶于水、醇和丙酮等有机试剂。二甲亚砜和N，N-二甲基甲酰胺虽然对偶氮甲酰胺溶解度高，但其保留时间与偶氮甲酰胺相似，会产生干扰，同时二者不易挥发，不易通过挥发除去，也很难对样品进行浓缩富集，故不适合作为提取溶剂。若用水提取，小麦粉在水中很容易成团，会影响偶氮甲酰胺的提取效果，同时小麦粉中的水溶性成分也会对偶氮甲酰胺的分析造成干扰。甲醇、乙腈等作为提取溶剂所得的水溶性杂质较多，也不适合作为提取溶剂。经过比较，以丙酮作为提取溶剂，可满足微量偶氮甲酰胺的提取要求，且所提取干扰杂质较少，因此选用丙酮作为提取溶剂。
　　3）在氮吹浓缩过程中，若将丙酮吹至近干，再加入定容溶剂时偶氮甲酰胺很难复溶回去，导致回收率极低，若在氮吹过程中加入1mL5%DMSO则能有效提高偶氮甲酰胺的回收率。
　　4）正己烷除去脂溶性杂质。
　　5）DMSO熔点18.4 ?C，低温下会凝固，因此标准储备液选择常温放置。

应助达人

完善一下，争取作为国家标准

感谢分享，，赞一个！

学习了，很有新意

你好 ，看到新国标GB 5009.283-2021 食品安全国家标准 食品中偶氮甲酰胺的测定使用的是C18色谱柱 ，你们试过没有C18柱子能做出来不