制备液相安装的调试

楼主分析的很透彻啊，不过这里有两个问题，我谈一下自己的看法啊（没有其他意思啊）。
第一个，色谱峰的前伸在制备色谱上主要是因为样品的溶解性不好引起的，制备的上样量不同分析，浓度一般都比较高，这样进样体积就可以小一点，峰展宽不会太严重。但是这样浓度过高的溶液在与初始流动相相遇是，可能会因为溶解性不好，部分溶解的样品会变回固体析出，留在色谱柱上无法迁移，只有当后面的新的流动相流过的时候重新将样品溶解，再带着样品迁移，这样就造成了部分样品会晚于之前的样品流出色谱柱，造成拖尾。如果临近的两个色谱峰分离度小的话，后面的色谱峰前伸后就可能与前面的色谱峰交叉。
第二个问题是关于上样量的，9.4*250 mm的色谱柱的死体积大概是10 mL，区区200 uL，根本不会过载，我用过10*250的柱子，上5 mL也没有问题的，针对不同的样品进样体积是没有说服性的，学术上大家衡量上样量一般都是用重量来做参考的。
说的不对的地方还请指正啊

应助达人

体积肯定会影响峰形的，不管是分析型还是制备型，都尽量用小一点的体积，在充分考虑溶解度的前提下，制备型的应适当提高上机溶液的浓度。

感谢你的意见。我忘记说了，样品的浓度是非常高的，大约是50mg/ml或更高。过载跟总量有关，跟体积也有一定的关系，跟溶剂有关，跟pH有关。上述进样量是在高浓度条件下最大比例（纯有机溶解不含水）。我从分析柱的比例推算出来的。所以如果用低浓度的话感觉是不一样的。

第一个问题，从分析型的色谱看，一般是溶剂效应造成的，这里也一样，开始样品是用纯甲醇溶解的，后来才改为流动相溶解。我认为如果是溶剂效应的话，则峰前伸。保留时间提前，最后出峰跟进微量时间基本一致。如果是你说的溶解性不好的问题，那么最后出峰的时间要晚于进微量的出峰时间。一个提前，一个延迟，是因为短时间流路中流动相的平衡破坏造成的。还有一种前伸的可能性是过载了，超过色谱柱的容量则不被填料交换而提前流出。

应助工程师

这也只能算实验室半制备，真正的制备要在200mm直径了，是有一个放大问题的

shimadzu 20ap的泵能到80ml每min

应助达人

低浓度、小体积进样有助于分离，但是对于制备色谱而言有点脱离本质了

应助达人

进2000太大了吗？平常进多少？

请问戴安的制备液相和分析液相的区别主要是在定量环上吗？谢谢

应助达人

学习了下制备色谱