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关于多胺类物质的检测

液相色谱(LC)

  • 大家好,我最近在做胱胺的HPLC检测(245nm处有吸收峰),由于其极性很强,即使用99%的水相,出峰时间也在1分钟左右。
    通过查阅去资料,发现可以通过离子对试剂来提高其保留时间,配方如下:50mM NaH2PO4,0.05mM SDS,2% ACN,体系pH用磷酸调至2.7。可奇怪的是换成离子对试剂后反而没有胱胺的峰了。
    可能的原因是什么?还有普通的C18柱子是否适合胱胺的检测?
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  • 小鱼儿111126

    第1楼2017/03/01

    流动相中的 离子对试剂SDS与胱胺形成中性物质,在C18上保留增强。当然,如果你的C18能承受高pH的话,流动相不加离子对试剂,换成加氨水,在碱性条件下应该也可以保留的(不过估计楼主的柱子耐受不了)。首先楼主确定,胱胺在245nm处有吸收峰。是不是走的时间不够,胱胺没出来呢?你进了几针都是这样吗?

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  • 夏天的雪

    第2楼2017/03/02

    应助达人

    一是可能生成其他物质改变了吸收波长,二是可能保留很强,没有洗脱下来

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  • 有水有渝

    第3楼2017/03/03

    应助达人

    用亲水柱,另外怎么看结构都不像是245吸收很强的样子,难道S、N上的孤对电子形成了强大的共轭体系?有紫外扫描图谱吗?

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