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求指点：方法转移过程中保留时间延迟了很多

louisa19

2017/08/19

液相色谱（LC）

手性纯度分析色谱条件：
柱子： CHIRALPAK OD-H(4.6mm*250mm*5μm)
流动相：正己烷：乙醇：三氟乙酸=90:10:0.1
流速： 0.5ml/min
进样量：50μl
运行时间：70 min
样品稀释剂：甲醇/乙醇/正己烷=15/10/75
仪器是一样的，只是方法的保留时间主峰40min，异构体45min，我们在做时保留时间是60min左右，这是什么原因啊？流动相也配置过两次，第一次60min，第二次更离谱在70min后了，是流动相配制问题吗？但也不会相差这么多啊？

分
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夏天的雪

第1楼2017/08/19

应助达人

流动相是在线混合还是预先混合的，流动相的配置或者混合方式要保持一致，如果是在线混合要考虑比例阀和泵的精密度一致；还有，色谱柱和仪器要有充分的预热和平衡。你在测试时样品出现保留时间的漂移可能也是上述两种原因引起的

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louisa19

第2楼2017/08/19

预先混合好的，色谱柱和仪器都平衡很长时间了的
夏天的雪(bingwang228) 发表:流动相是在线混合还是预先混合的，流动相的配置或者混合方式要保持一致，如果是在线混合要考虑比例阀和泵的精密度一致；还有，色谱柱和仪器要有充分的预热和平衡。你在测试时样品出现保留时间的漂移可能也是上述两种原因引起的

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有水有渝

第3楼2017/08/19

应助达人

楼主的方法转移指的是通一个实验室，不同仪器吗，检查下仪器的压力和流量

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louisa19

第4楼2017/08/21

不同实验室，不同仪器，我们另外一个样，保留时间没变化，仪器流速应该没问题，压力的话，是问下另一个实验室的压力吗？
有水有渝(1638724) 发表:楼主的方法转移指的是通一个实验室，不同仪器吗，检查下仪器的压力和流量

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夏天的雪

第5楼2017/08/24

应助达人

你配置了两次流动相，保留时间发生了改变，说明流动相比例对保留时间的影响很大，很有可能就是这个原因
louisa19(v2857655) 发表: 预先混合好的，色谱柱和仪器都平衡很长时间了的

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hujiangtao

第6楼2017/08/25

应助达人

正相的影响比反相的大

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