液相基线问题求助

应助达人

建议冲洗色谱柱试一下，貌似色谱柱有污染

一根新柱子，上午进行了活化。

应助达人

1.波长看不清楚，尽量不要使用靠近210nm的，否则基线很容易受干扰。
2.有机相最好能添加5%水相，有助于四元泵混合流动相，对于基线平稳有帮助。
3.磷酸作为离子对试剂，AB两相最好都添加磷酸，这样梯度过程中离子对试剂含量平稳，不容易造成基线波动。

应助达人

先做等度，如果等度稳定，那就是梯度引起的，那就和泵、比例阀有关了，据说试剂也可以影响到梯度基线，用高纯度的试剂试试

应助达人

用梯度方法多走几次看看有什么变化

找了各种原因后，发现可能是水相管路被污染了，将有机相换到原来的水相管路，获得了稳定的基线。

应助达人

感谢反馈。 水相管路也要不定期的进行冲洗，最好用有机相保存，否则也会长菌

应助达人

许多水相流路因长时间使用未清洗造成谱图异常，建议在水相中加点叠氮化钠抑制细菌产生。

叠氮化钠毒性较大，建议还是勤换流动相的好