梯度 基线波动

应助达人

你这方法全是突升突降，在一定时间走等度不什么都解决了

试过2min5%～95%，再梯地末端维持0.5min的方法，走出来也是基线斜坡式的下降；另外试过在梯度中间加2min的40%乙腈等度冲洗，这样走样品直接就不出峰了

应助达人

2min5%～95%这个梯度变化基线漂是正常的，变化有点快，同事基线变化比设置的晚也是正常的，一是管路有个路径，同时仪器和色谱柱也有一个平衡过渡的时间

50mm的短柱，我想的是设置一个3分钟左右快速分离的方法。照我试验的结果，每次运行压力都会维持2min左右才开始快速变化我的理解是前面这2*0.5=1ml是不是系统的延迟体积，两分钟后基线下降的点才是我方法设置里梯度的变化开始。

这个延迟体积也太夸张了吧，讲不通！没有做过方法开发完全摸不着头脑……

应助达人

看你的分离度情况，峰也不是很多，没有必要做变化这么大的梯度，另外检测波长是多少，是不是比较低了。梯度变化你可以2min从50%变到80%，或者不断试验把低比例变高多少，高比例部分就下降多少，试出最佳梯度，甚至等度都可以试一下。