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液相正相系统中 加入二乙胺浓度影响色谱柱分离

  • 馒头只是一坨面
    2018/12/18
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 悬赏金额:30积分状态:已解决
  • 做正相。方法流动相→ 无水乙醇:二乙胺=100:0.4(100ml无水乙醇要加0.4ml二乙胺)
    用过大赛璐的柱子,用过赛分的柱子。
    最初使用时异构体分离效果还挺好,使用几次后就不行了。无水乙醇冲洗,反着冲也是不行。
    使用前无水乙醇小流速冲洗,使用后小流速冲洗。那台仪器也一直做正相。
    我问色谱柱厂家,说二乙胺浓度有点高,如果反着冲后还是不行的话色谱柱就废了。
    想问下各位老师,遇到过类似的情况吗?或者这个浓度是对色谱柱内基质影响大不。
    感谢

言逊 2018/12/18

[quote]原文由 [b]馒头只是一坨面(v3032387)[/b] 发表: 我是咨询厂家后反冲的色谱柱-_-|| 之前没注意过溶液的PH 条件是那样就用了 我试试看去 之前大赛璐的也咨询过厂家 ,主要是最初用过一根大赛璐的,也用了挺久,后来再买的大赛璐和赛分都没有第一根撑时候,可是溶剂没有变。就很奇怪。[/quote] 那现在出问题了,我们就从源头查起咯: 1.首先把色谱柱的说明书拿出来细看一下,看看柱子使用的条件和范围; 2.测测你溶液的pH值,是否是一直处于你色谱柱耐受临界点使用,这样对你的色谱柱是有一定的伤害的; 3.找厂家要色谱柱清洗的方法,与自己平时清洗的方法进行对比,分析一下自己清洗色谱柱的方法是否合理与完全; 4.柱子也有可能有批间差异,我们实验室也遇到过,有些柱子就是比较耐用,有些就不行,这个就没办法了。 5.柱子千万别反冲,那是实在迫不得已无可挽救的时候才那么做。 你自己先排查排查,祝好!

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  • 言逊

    第1楼2018/12/18

    应助达人

    有没有测过溶液的PH?是否有超过柱子耐受的pH范围?可以咨询厂家一些色谱柱使用后的清洗维护方法,千万别反冲色谱柱。

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  • 馒头只是一坨面

    第2楼2018/12/18

    我是咨询厂家后反冲的色谱柱-_-||
    之前没注意过溶液的PH
    条件是那样就用了 我试试看去
    之前大赛璐的也咨询过厂家 ,主要是最初用过一根大赛璐的,也用了挺久,后来再买的大赛璐和赛分都没有第一根撑时候,可是溶剂没有变。就很奇怪。

    言逊(Insm_220b9c52) 发表:有没有测过溶液的PH?是否有超过柱子耐受的pH范围?可以咨询厂家一些色谱柱使用后的清洗维护方法,千万别反冲色谱柱。

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  • 言逊

    第3楼2018/12/18

    应助达人

    那现在出问题了,我们就从源头查起咯:
    1.首先把色谱柱的说明书拿出来细看一下,看看柱子使用的条件和范围;
    2.测测你溶液的pH值,是否是一直处于你色谱柱耐受临界点使用,这样对你的色谱柱是有一定的伤害的;
    3.找厂家要色谱柱清洗的方法,与自己平时清洗的方法进行对比,分析一下自己清洗色谱柱的方法是否合理与完全;
    4.柱子也有可能有批间差异,我们实验室也遇到过,有些柱子就是比较耐用,有些就不行,这个就没办法了。
    5.柱子千万别反冲,那是实在迫不得已无可挽救的时候才那么做。
    你自己先排查排查,祝好!

    馒头只是一坨面(v3032387) 发表: 我是咨询厂家后反冲的色谱柱-_-||
    之前没注意过溶液的PH
    条件是那样就用了 我试试看去
    之前大赛璐的也咨询过厂家 ,主要是最初用过一根大赛璐的,也用了挺久,后来再买的大赛璐和赛分都没有第一根撑时候,可是溶剂没有变。就很奇怪。

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  • 馒头只是一坨面

    第4楼2018/12/18

    谢谢您了。 这个实验之前都是按照标准测定。没注意PH对色谱柱的影响,惭愧啦。
    测了下PH,的确比较碱。超出点范围了。
    厂家说的清洗方法也只是用无水乙醇小流速冲,我们冲过很久还是不行,应该是色谱柱本身损坏了。
    以后做实验一定得多关注下这方面。再次感谢啊

    言逊(Insm_220b9c52) 发表: 那现在出问题了,我们就从源头查起咯:
    1.首先把色谱柱的说明书拿出来细看一下,看看柱子使用的条件和范围;
    2.测测你溶液的pH值,是否是一直处于你色谱柱耐受临界点使用,这样对你的色谱柱是有一定的伤害的;
    3.找厂家要色谱柱清洗的方法,与自己平时清洗的方法进行对比,分析一下自己清洗色谱柱的方法是否合理与完全;
    4.柱子也有可能有批间差异,我们实验室也遇到过,有些柱子就是比较耐用,有些就不行,这个就没办法了。
    5.柱子千万别反冲,那是实在迫不得已无可挽救的时候才那么做。
    你自己先排查排查,祝好!

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  • lijing320323

    第5楼2018/12/18

    加了碱,可以改变ph

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