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求助!关于液相色谱目标峰和杂质峰保留时间相差很远的问题

  • Insm_31ac6d6a
    2019/09/18
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 求问各位大侠!流动相 乙腈和水(0.1%的三氟乙酸)50:50,柱子 C18柱
    检测波长227 nm ,柱温 40度,测得目标化合物的保留时间在4.7 min,在17 min 和25min又分别出了一个杂质峰。想问一下目标峰和杂质峰保留时间相差很大怎么办? 补充:目标化合物含氨基,极性有些大
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  • 小卡

    第1楼2024/09/19

    如果目标峰和杂质峰保留时间相差很大,可以考虑以下方法来改善分离效果:

    **一、优化色谱条件**

    1. 调整流动相比例:
    - 尝试改变乙腈和水的比例,比如增加乙腈的比例以缩短保留时间,或者减少乙腈比例以延长保留时间,看是否能进一步拉开目标峰与杂质峰的距离,或者使它们的分离度更好。
    - 也可以考虑调整三氟乙酸的浓度,观察对峰形和分离的影响。

    2. 改变柱温:
    - 适当升高或降低柱温,观察对保留时间和分离度的影响。但要注意温度变化不能对色谱柱造成损害,且温度变化对不同化合物的影响程度不同。

    3. 优化流速:
    - 调整流动相流速,一般降低流速可能会增加保留时间,提高分离度,但分析时间也会相应延长。

    **二、样品前处理**

    1. 净化样品:
    - 采用合适的样品前处理方法,如固相萃取等,去除可能干扰分离的杂质,减少杂质峰的出现。

    2. 调整样品溶剂:
    - 确保样品溶剂与流动相相匹配,避免因溶剂效应导致峰形变形或保留时间变化。

    **三、更换色谱柱**

    1. 选择不同选择性的 C18 柱:
    - 不同厂家或型号的 C18 柱可能具有不同的选择性,可以尝试更换另一根 C18 柱,看是否能改善分离效果。

    2. 考虑其他类型色谱柱:
    - 如果目标化合物极性较大,可以考虑使用极性较强的色谱柱,如 HILIC 柱等,可能会对极性化合物有更好的分离效果。

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