mPEG2000、合成新药API及其手性异构体、亚硝胺类化合物的分离检测
——纳谱分析C18、手性、PFP柱的使用体验
我们中科谱研（北京）科技有限公司创立于2017年， 专业提供药物质量分析方法开发、方法验证及检测。此外，提供药包材相容性研究、一致性评价研究及中药质量分析服务。通过与纳谱分析技术专家的沟通，我们对纳谱分析的技术非常认可，并对其产品质量有着很高的期盼。两年来我们根据项目需要使用了多款纳谱分析分析的色谱柱，包括ChromCoreC18、ChromCoreC8、ChromCorePFP、ChromCoreHILIC-Amide液相色谱柱以及UniChiral系列手性柱。下面我们分享三个例子来体现纳谱分析色谱柱的使用情况，包括ChromCore C18对聚合物中残留mPEG2000的检测，UniChiral AD手性柱对合成新药API及其手性异构体的分析检测，ChromCore PFP进行亚硝胺类化合物（NDMA, NEIPA和NDIPA）的检测。
一、mPEG2000的检测
聚乙二醇系列物质为环氧乙烷水解产物的聚合物，依相对分子量不同而性质不同，从无色无臭粘稠液体至蜡状固体。聚乙二醇无毒，无刺激性，可广泛应用于各种药物制剂；其两亲性，既可以溶解于水，又可以溶解于绝大多数的有机溶剂，适用于生物材料表面改性。
聚乙二醇单甲醚mPEG2000，具有良好水溶性、润滑性、生理惰性、对人体无刺激、温和，因此广泛应用于建筑、纺织、日化和制药行业。本应用中采用纳谱分析ChromCore C18色谱柱对聚合物材料中的残留mPEG2000的检测。用mPEG2000标准品进样定位，对含mPEG2000的样品进行分析，结果见下图，mPEG2000与前后相邻未知杂质峰均可良好分离，适用于该物质的检测。
色谱柱：ChromCore C18, 5 μm, 4.6×250 mm
流动相：A：乙腈；B：水
流速：1.0 mL/min
柱温：35℃
进样量：5 μL
样品：1,Unkown-1；2, mPEG2000 (14 μg/mL)；3, Unkown-2
检测器：CAD
二、合成新药API及其手性异构体的检测
自从20世纪60年代发生"反应停"事件以来,药物手性的研究在新药研发领域引起了极大关注。手性异构体在生物体中可能表现出截然不同的药理、药物动力学、代谢和毒理活性等。近年来结合手性光谱的手性高效液相色谱技术在手性药物的分析、测定和分离等方面得到广泛应用，这对于手性药物对映体含量的检测和质量控制至关重要。
本应用中，我们采用纳谱分析UniChiral AD色谱柱对合成新药API及其手性异构体的分析检测。通过实验，用乙醇为流动相就可以达到API与其手性异构体的有效分离。
色谱柱：UniChiral AD, 5μm, 4.6×250mm
流动相：乙醇
流速：0.2 mL/min
柱温：30 ℃
进样量：10 μL
样品：1, API (合成新药, 1 mg/mL)；2, API chiral isomer (5μg/mL)
检测器：DAD/257nm
三、亚硝胺类化合物的检测
亚硝胺类化合物中NDMA对实验动物具有很强的致癌活性，被国际癌症研究组织判定为 2A 类致癌物。常见的亚硝胺类化合物包含NDMA，NDEA，NEIPA，NDIPA，NDBA等。在ICH M7指南中明确提出亚硝胺类化合物属于具有较高致癌性的物质，因此该类化合物的含量应在药品中予以严格控制。
由于亚硝胺类化合物的特殊性质，检测药品中该类化合物的含量对于保障药品质量和用药安全意义非凡。本应用中通过液相质谱联用的检测手段，采用纳谱分析ChromCore PFP色谱柱进行亚硝胺类化合物（NDMA，NEIPA和NDIPA）的检测，三种待测物均能在色谱柱上有效保留，且基线噪音低，在ppb（ng/mL）级别的浓度下可有效检出这三种物质，可用于NDMA, NEIPA和NDIPA的痕量分析。
图. NDMA, NEIPA和NDIPA标准品谱图
色谱柱：ChromCore PFP, 3μm, 3×100 mm
流动相：A：0.1%甲酸-甲醇；B：0.1%甲酸-水
流速：0.45 mL/min
柱温：35℃
进样量：5 μL
样品：1, NDMA (64ng/mL)；2, NEIPA (18ng/mL)；3, NDIPA(18ng/mL)
检测器：LC-MS
整体评价：通过两年多的合作，我们对纳谱分析的技术水平和产品质量是认可和满意的，纳谱色谱柱往往能在关键时刻出得奇兵，解决困扰许久的问题。此外，供货及时和服务专业使我们合作十分顺畅。我们希望纳谱分析将来越做越好，成为具有国际水平的中国品牌。
本文为【纳谱分析第一有奖征文活动】获奖作品，原作者信息：
中科谱研（北京）科技有限公司 李**
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