新官人
第1楼2020/07/20
解答:
我们已经知道,“斜率”是用来判定色谱峰积分起点和终点以及去除不必要的噪声积分。斜率值必须设定合适值,那么在方法开发时,初始定数据处理的斜率应该按照什么原则呢?
我们知道斜率值不能太低,应当避免将基线噪声的扰动积分成色谱峰。那么就首先需要考察基线噪声的状态,同一台色谱仪,使用不同色谱柱、不同检测器、不同操作条件都会使得基线噪声的幅度不同。
常见的FID检测器、TCD检测器分析获得的基线往往基线噪声较低,那么就应当使用较小的斜率;而FPD检测器、NPD检测器一般基线噪声会略大,那么就应当使用较大的斜率。
分析方法中柱温较高、色谱柱固定相耐温较低、固定相含量较高、系统存在一定程度的污染,都有可能造成基线噪声偏大,那么合适的斜率设定值就应当较大。
此外,外部气源、电源环境等情况都会影响基线噪声。
这些复杂的情况下,如何确定设定斜率值呢?某些仪器厂商色谱数据工作站中的“斜率测试”就是一个比较方便的工具。
斜率测试的意义:
在色谱仪稳定工作,色谱基线平稳时,点击“斜率测试”按钮,工作站自动测量一段时间基线的波动情况,计算出基线的推荐斜率最小值。
实验中我们一般不直接使用这个数值,需要把这个数值略微增加之后,设定到工作站积分参数中,使用这个斜率值,可以保证基线的波动不会作为色谱峰来积分。
或者说,斜率测试得到的斜率值是可以使用的最小斜率。
注意在执行“斜率测试”的期间,一定确保基线不能存在漂移或者出峰,否则工作就会计算出很大的推荐设定斜率值。
“斜率测试”还有另外的作用,我们可以根据斜率测试的值作为判定色谱系统是否稳定的标志——如果斜率测试值越小,表明系统越稳定。