解答:
首先要区分两个概念,色谱峰上某点的斜率和工作站给定的斜率阈值。
色谱图上某个数据点的一阶导数值为该数据点的斜率,数据点斜率一般是用差分的方法获得的。
图5-19斜率的意义即:
工作站的积分参数给出的“
斜率”
是斜率的阈值。该参数的作用是确定色谱峰的积分起点终点和排除基线噪声的积分。理想情况下,色谱图基线斜率为0
,随信号强度的递增,色谱图上的某点的斜率逐渐增大,如图中的θ1
和θ2
,当θ
数值大于给定的斜率阈值,工作站即认为该点为色谱峰的“
起点”
。色谱峰数据点中,斜率最大的点为拐点,然后斜率逐渐减小,至色谱峰顶点,斜率变为0
。色谱峰的后半部分,斜率为负值,色谱峰后延的拐点,斜率最小。当后半部分色谱数据某点的斜率值小于给定阈值时,工作站即认为该点为色谱峰的“
终点”
。如图所示:
图5-20色谱图和一阶导数曲线
当然,实际上没有这么简单,由于基线存在噪声的问题,工作站一般会连续测量多个数据点,当连续的几个点斜率都大于给定值,工作站才认为色谱峰开始。如果设定斜率值较大,色谱峰积分的起点和终点会发生变化。如图5-21
所示。
图5-21采用较小斜率
使用较大斜率的积分结果,如图5-22
:
图5-22采用较大斜率
如果给定斜率值大于色谱峰拐点处的斜率,该色谱峰不被积分。当色谱峰某个单独色谱峰没有被积分,要考虑是否定斜率值过大。另外,如果斜率设定值过小,系统会将基线的噪声也积分成色谱峰,这是需要避免的现象,如图5-23
所示。
图5-23斜率设定过小
增大斜率值之后,如图5-24
所示:
图5-24增大斜率