液相峰出现牛角峰

应助达人

最好是用四无泵，分别过滤后使用两个流路在线混合。如果使用先混合再过滤，抽滤时乙腈会因为易挥发损失一些，造成比例不准确。如果要分开过滤再混合，容易造成混合不均匀。如果液相没有带脱气机也溶易出现气泡。峰分叉可能是因为流动相不无效造成的。

应助达人

1.如果流动相走的是是等比例，可以先将流动相混均后再过膜脱气。
2.这俩图的保留时间不一样，说明你们走的流动相是有变化的。
3.上一张正常的图，大家好给你分析原因。

正常是这样子

是等比例，有重新混匀，但没有重新过膜，重新过膜是可以改善什么方面呢

比例确实会不准，我们纠结的问题是比例不准会不会是引起峰分裂的原因，因为时而出问题，时而正常的

应助达人

建议你们把两个或者三个流动相分别配制、抽滤，然后使用仪器的在线混合功能尝试一下，多做对比，按照差异分析问题。个人觉得你们的问题在于1）流动相比例不准确2）流动相预混合不正确，理论上需要把混合的两个或者三个流动相分别配制好，然后混合在一起超声、抽滤，根据使用条件控制总量不超过10个小时，到时间之后需要重新制备。以便控制实验条件的一致性。注意同比例的2个流动相在线混合比预混合的出峰时间会晚一些。

你说的这些回头我问问领导看看尝试一下，那如果之前用剩下的流动相，当时没问题，再拿来用又出现了分裂，又会是因为什么呢

学习了

应助达人

说明流动相不稳定，有变化了。