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【实战宝典】水相和有机相都加酸的目的是什么?

液相色谱(LC)

  • 问题描述:三氟乙酸(TFA)一般是加到水相当中,但有的方法是水相和有机相均加入,如:流动相A为水+0.1%TFA;流动相B为乙腈+0.08%TFA。这样的做法目的是什么?

    解答:
    1)水相和有机相中都加入TFA,可以使TFA的浓度在整个运行过程中保持恒定,进而保持pH稳定,可以有效地降低基线波动,有利于待测物保留时间保持恒定;

    2)如果只在水相中添加,有机相中不加,那么在走梯度时,由于两相比例会随时间变化,流动相实时的pH是不一样的,可能会对有些化合物的分离产生影响,导致目标物保留时间偏移。

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