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【实战宝典】液相色谱在使用缓冲盐时的注意事项有哪些?
小官人
2021/03/22
私聊
液相色谱(LC)
问题描述:在方法开发中,如何正确选择和使用缓冲盐?
液相色谱
在使用缓冲盐时有哪些注意事项?
解答:
关于如何正确选择和使用缓冲盐在前文已有详细论述,这里主要说一下
液相色谱
在使用缓冲盐时的注意事项。
(
1
)避免使用盐酸等含有卤素离子的盐,卤酸盐对钢质有腐蚀作用,同时需要了解柱子的
pH
耐受限度,不要把
pH
值调得过高或者过低。
(
2
)缓冲盐的浓度一般在
10~50mmol/L
比较适合,太低的话起不到作用,太高了对色谱柱和
液相
系统有影响。
(
3
)缓冲盐和甲醇
/
乙腈组成流动相时,不宜少于
10%
(
V
/
V
),太低的缓冲液比例会使缓冲盐析出。
(
4
)使用过缓冲盐的流动相后,柱子一定要及时清洗,而且不能马上用纯有机相如甲醇等,一定要先用带水相的溶液清洗,比如先用
5%~10%
的甲醇
/
水(不能用纯水冲,否则容易造成键合相流失)把缓冲盐冲洗出来,然后用纯有机溶剂保存色谱柱。
(
5
)缓冲液最好要现配现用,缓冲液往往是良好的菌类培养液。
(
6
)若
液相色谱
系统长期使用缓冲溶液,要注意观察单向阀等处有无结晶,若有白色盐类析出,可考虑一定周期内用
10%
硝酸(如
30mL
)冲洗一下缓冲盐管路(不接柱子接两通),再用
5
倍水冲洗可以避免整个无机相管路的堵塞。
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