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【实战宝典】不同溶剂对待测物质的紫外吸收波长有什么影响？

小官人

2021/03/23

液相色谱（LC）

问题描述：用紫外分光光度计测叶黄素含量，国标中用无水乙醇最佳波长是445nm，文献中用正己烷最佳波长是474nm，这是因为溶剂不同造成的吗？

解答：（1）紫外光谱是用紫外光待测物紫外吸收波长与所采用的溶剂密切相关，不同溶剂对紫外吸收峰波长和强度影响不同，特别是对波长影响更大。溶剂极性对溶质最大吸收峰λ_max的影响与溶剂的介电常数和溶质分子的电子跃迁性质有关。

（2）当用光照射时，基团中的电子吸收光能发生能级改变，形成特征的强吸收带，这些基团称作发色团，它们都含有不饱和键或未共用电子对，能产生π-π*及n-π*的跃迁。溶剂极性越强，由π-π*跃迁产生的谱带向长波方向移动越显著。这是因为发生π-π*跃迁的分子激发态的极性总是大于基态，在极性溶剂作用下，激发态能量降低的程度大于基态，从而实现基态到激发态跃迁所需能量变小，致使吸收带发生红移；所用溶剂极性越强，由n-π*跃迁产生的谱带向短波方向移动越明显。这是因为发生n-π*跃迁的分子都含有未成键n电子，这些电子会与极性溶剂形成氢键，其作用强度是极性较强的基态大于极性较弱的激发态。因而基态能级比激发态能级的能量下降幅度大，实现n-π*跃迁所需能量也响应增大，致使吸收谱带发生蓝移。

（3）在选择测定吸收光谱曲线的溶剂时应注意如下几点：

a.能很好地溶解被测物，并形成良好化学和光化学稳定性的溶剂；

b.在溶解度允许范围内，尽量选择极性较小的溶剂；

c.溶剂在样品的吸收光谱区无明显吸收。

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