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新手求助液相色谱问题

  • Insm_8b18c87b
    2021/07/02
    • 私聊

液相色谱（LC）

  • sec柱子分离纯蛋白，采用的流动相是ph为3的甲酸铵水溶液，出的峰为图一，降低流动浓度后峰为图二，原因是啥啊？感谢大佬的指导！
    柱子是半年前买的，没用几次。
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    +关注 私聊

  • 有水有渝

    第1楼2021/07/05

    应助达人

    降低流动浓度是什么浓度，建议使用原有流动相分析看看有没有再现性

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  • Insm_8b18c87b

    第2楼2021/07/05

    原是20mmol/L甲酸安流动相，降低后是10mmol/L。重现性很好，做了五次都是这样子的

    有水有渝(xky0230699) 发表:降低流动浓度是什么浓度，建议使用原有流动相分析看看有没有再现性

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  • 有水有渝

    第3楼2021/07/06

    应助达人

    用的是凝胶色谱柱吗，建议把色谱柱多清洗一下，流动相恢复20mmol/L甲酸铵试试

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  • nuliyang

    第4楼2021/07/06

    是凝胶柱子

    有水有渝(xky0230699) 发表:用的是凝胶色谱柱吗，建议把色谱柱多清洗一下，流动相恢复20mmol/L甲酸铵试试

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  • dadgoh

    第5楼2021/07/06

    应助达人

    低浓度下做一个紫外扫描，确认最大吸收是否偏移或减小。

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  • nuliyang

    第6楼2021/07/06

    我忘了说明了，图一（20mmol甲酸铵流动相）那个红色的是220nm波长，图二（10mmol甲酸铵流动相）那个黑色的是220nm。因为不是连续做的，所以颜色不一样。。。

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