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hplc样品峰分离不开怎么办

  • Ins_1048f27a
    2021/07/18
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 发酵液测组分用HPLC,标品打了,可以分开,但是打样品的时候峰就分不开了。用的C18反向色谱柱,流动相是甲醇:水:冰醋酸,试了流动相甲醇和水的配比,还是分不开。求高人指点!
    图一是标品,图二是样品
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  • sdlzkw007

    第1楼2021/07/18

    应助达人

    简单来说就是复杂样品测试过程中分离能力有限,不能满足实验要求。需要通过改变梯度洗脱条件或者通过改变检测方法(比如液质联用法)才能有点儿效果。

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  • xiaolanzi5

    第2楼2021/07/18

    应助达人

    调整流动相,过个小柱净化一下样品。如果目标物响应还不错,可以减少进样量试试。

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  • Ins_1048f27a

    第3楼2021/07/18

    请问你说的是离子交换柱吗

    xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:调整流动相,过个小柱净化一下样品。如果目标物响应还不错,可以减少进样量试试。

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  • Ins_1048f27a

    第4楼2021/07/18

    但是我这个HPLC文献中有人这样做,人家就能打出来,我按照他的流动相还有参数做的,就做不出来,分离不开??

    sdlzkw007(sdlzkw007) 发表:简单来说就是复杂样品测试过程中分离能力有限,不能满足实验要求。需要通过改变梯度洗脱条件或者通过改变检测方法(比如液质联用法)才能有点儿效果。

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  • xiaolanzi5

    第5楼2021/07/18

    应助达人

    也可以尝试一下氨基固相萃取柱

    Ins_1048f27a(Ins_1048f27a) 发表:请问你说的是离子交换柱吗

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  • valorb

    第7楼2021/07/18

    样品中有干扰组分

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  • Ins_1048f27a

    第8楼2021/07/19

    那我产品能打出来分离开,是不是流动相没问题?

    valorb(654456) 发表:样品中有干扰组分

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  • Ins_1048f27a

    第9楼2021/07/19

    我的标品分离的很好,是不是就是流动相没问题?

    matel_slug(matel_slug) 发表:换柱子看看

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  • 安平

    第10楼2021/07/19

    应助达人

    关键的问题是,样品组成较为复杂。

    楼主最好详细说说具体的分析条件和分析目的。 是否分析发酵液中的有机酸类?

    可以考虑调节流动相比例,增加保留改善分离。

    但是样品复杂未必能够完全分离的。

    是否可以将样品净化,如何净化。取决于样品和目标组分的性质。可以考虑使用离子交换的方法净化或者去分离样品。

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