各位前辈，色谱分析中的定性样和校正样有什么区别

应助达人

定性样就是用来定性的样品，校正样可以作为定量和期间核查等检测仪器性能的样品。

感谢前辈，那对于一台什么都没有的色谱仪，我想去建方法，我是不是应该先进一个定性样去测定各组分的保留时间，通过这个定性样的数据去调节色谱仪的参数，然后再进不同浓度的校正样品去建立校正曲线呢，是这样的顺序么

应助达人

这两个概念在哪里看到的？一般都是用标准品进行定性定量

这个是 我们领导统计的项目试剂耗材里 GB/T30519需要的试剂

应助达人

1.色谱分析中的定性样和校正样有什么区别?
色谱分析定性样其实就是某个样品都有特征的质谱图。该样品被离子源打碎之后会形成特征的碎片，检测器检测到这些碎片之后按质核比从小到大排列，并且按比例高低显示丰度比。你知道样品的特征离子,通过提取需要的特征离子,通过特征离子碎片和谱库的谱图对比就可以定性是什么化合物。
校正样作用测试方法过程和仪器性能变化带来的影响,校正样类型很多,比如某内标物BB,是用来以校准和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度,再比如质控溶液,标准曲线发生漂移的校正。主要是曲线的校正（从某种意义上讲是含量对比的校正）。

应助达人

参考一下气相色谱方法建立步骤
在实际工作中，当我们拿到一个样品，我们该怎样定性和定量，建立一套完整的分析方法是关键，下面介绍一 些常规的步骤：

1、样品的来源和预处理方法

????? gc能直接分析的样品通常是气体或液体，固体样品在分析前应当溶解在适当的溶剂 中，而且还要保证样品中不含gc不能分析的组分（如无机盐），可能会损 坏色谱柱的组分。这样，我们在接到一个未知样品时，就必须了解的来源，从而估计样品可能含有的组分，以及样品的沸点范围。如果样品体系简单，试样组分可汽 化则可直接分析。如果样品中有不能用gc直接分析 的组分，或样品浓度太低，就必须进行必要的预处理，如采用吸附、解析、萃取、浓缩、稀释、提纯、衍生化等方法处理样品。

2、确定仪器配置

所谓仪器配置就是用于分析样品的方法采用什么进样装置、什么载气、什么色谱柱以及什么检测器。

一般应首先确定检测器类型。碳氢化合物常选择FID检测 器，含电负性基团（F、Cl等）较多且碳氢含量较少的物质易选择ECD检测 器；对检测灵敏度要求不高，或含有非碳氢化合物组分时，可选择TCD检测器； 对于含硫、磷的样品可选择FPD检测器。

对于液体样品可选择隔膜垫进样方式，气体样品可采用六通阀或吸附热解析进样方法，一般色谱仅配置隔膜垫 进样方式，所以气体样品可采用吸附-溶剂解析-隔膜垫进样的方式进行分析。

根据待测组分性质选择适合的色谱柱，一般遵循相似相容规律。分离非极性物质时选择非极性色谱柱，分离极 性物质时选择极性色谱柱。色谱柱确定后，根据样本中待测组分的分配系数的差值情况，确定色谱柱工作温度，简单体系采用等温方式，分配系数相差较大的复杂体 系采用程序升温方式进行分析。

常用的载气有氢气、氮气、氦气等。氢气、氦气的分子量较小常作为填充柱色谱的载气；氮气的分子量较大， 常作为毛细管气相色谱的载气；气相色谱质谱用氦气作为载气。

3、确定初始操作条件

当样品准备好，且仪器配置确定之后，就可开始进行尝试性分离。这时要确定初始分离条件，主要包括进样 量、进样口温度、检测器温度、色谱柱温度和载气流速。进样量要根据样品浓度、色谱柱容量和检测器灵敏度来确定。样品浓度不超过10mg/mL时填充柱的进样量通常为1-5uL，而对于毛细管柱，若分流比为50：1时，进样 量一般不超过2uL。进样口温度主要由样品的沸点范围决定，还要考虑色谱 柱的使用温度。原则上讲，进样口温度高一些有利，一般要接近样品中沸点最高的组分的沸点，但要低于易分解温度。

4、分离条件优化

分离条件优化目的就是要在最短的分析时间内达到符合要求的分离结果。在改变柱温和载气流速也达不到基线 分离的目的时，就应更换更长的色谱柱，甚至更换不同固定相的色谱柱，因为在gc中，色 谱柱是分离成败的关键。

5、定性鉴定

所谓定性鉴定就是确定色谱峰的归属。对于简单的样品，可通过标准物质对照来定性。就是在相同的色谱条件 下，分别注射标准样品和实际样品，根据保留值即可确定色谱图上哪个峰是要分析的组分。定性时必须注意，在同一色谱柱上，不同化合物可能有相同的保留值，所 以，对未知样品的定性仅仅用一个保留数据是不够的，双柱或多柱保留指数定性是gc中较为 可靠的方法，因为不同的化合物在不同的色谱柱上具有相同保留值的几率要小得多。条件允许时可采用气相色谱质谱联机定性。

6、定量分析

要确定用什么定量方法来测定待测组分的含量。常用的色谱定量方法不外乎峰面积（峰高）百分比法、归一化 法、内标法、外标法和标准加入法（又叫叠加法）。峰面积（峰高）百分比法最简单，但最不准确。只有样品由同系物组成、或者只是为了粗略地定量时该法才是可 选择的。相比而言，内标法的定量精度最高，因为它是用相对于标准物（叫内标物）的响应值来定量的，而内标物要分别加到标准样品和未知样品中，这样就可抵消 由于操作条件（包括进样量）的波动带来的误差。至于标准加入法，是在未知样品中定量加入待测物的标准品，然后根据峰面积（或峰高）的增加量来进行定量计 算。其样品制备过程与内标法类似但计算原理则完全是来自外标法。标准加入法定量精度应该介于内标法和外标法之间。

7、方法的验证

所谓的方法验证，就是要证明所开发方法的实用性和可靠性。实用性一般指所用仪器配置是否全部可作为商品 购得，样品处理方法是否简单易操作，分析时间是否合理，分析成本是否可被同行接受等。可靠性则包括定量的线性范围、检测限、方法回收率、重复性、重现性和 准确度等。

应助达人

应该先进一个定性样去测定各组分的保留时间，通过这个定性样的数据去调节色谱仪的参数，然后再进不同浓度的校正样品去建立校正曲线呢，是这样的顺序么 ?除非你只做定性分析筛选,只需要知道有还是没有,通过一针某个浓度标物进样测试,然后进未知样品,通过样品的出峰时间和特征离子丰度与该浓度标物比进行匹配进行判断.
一般做法都是参照某个测试方法,通过不同浓度的标准曲线进行定性定量分析

感谢前辈，那建立校正曲线的目的不就是为了进行定量计算嘛

应助达人

是啊，可以这么理解