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GPC,SEC,GFC色谱是一个意思吗

液相色谱(LC)

  • 凝胶色谱GPC,体积排阻SEC,凝胶过滤GFC等色谱是一个意思吗
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  • 叮叮当当

    第1楼2021/12/14

    应助达人

    以分子大小为基础的分离通常采用体积排阻色谱SEC进行。这种色谱类型在分离聚合物,包括生物聚合    物时使用。通常用来表征聚合物分子量及分子量分布。色谱柱一般采用不锈钢,填充凝胶,交联键合聚合物或孔径经过严格控制的硅胶颗粒。分离机理与其他色谱类型不同,溶质颗粒与固定相间不应有化学相互作用,而是依据分子在溶液中的大小而进行的。
    我们用凝胶渗透色谱(GPC)描述有机聚合物(如塑料)在有机溶剂中的分离,而使用水相SEC描述主要使用水相流动相对水溶性有机聚合物(如聚乙烯醇)和水溶性生物聚合物(如蛋白质、核酸和多糖)进行的分离。
    凝胶过滤色谱(GFC)用来描述生物聚合物(如蛋白质)在低压下的分离。

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  • JOE HUI

    第2楼2021/12/14

    应助达人

    三者有点差异:1、凝胶过滤色谱法-GFC
    一般用于分离水溶性的大分子,凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。

    2、凝胶渗透色谱法-GPC
    主要用于有机溶剂中可溶的高聚物相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。
    3.SEC的基本原理
    凝胶本身具有三维网状结构,大分子在通过这种网状结构上的孔隙时被排阻,小分子通过时被滞留。分子量大小不同的多种成份在通过凝胶床时,按照分子量大小“排队”,凝胶表现分子筛效应。

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  • mingxiaoyan

    第3楼2021/12/14

    这三者的关系如下:
    尺寸排除模式的分类
     尺寸排阻法英语表示为Size Exclusion Chromatography,取3个首字母,也可以表示为SEC。SEC可以通过流动相是水溶液还是有机溶剂进行分类。
     使用有机溶剂(THF(四氢呋喃)、氯仿等)的情况,英语称为Gel Permeation Chromatography,取首字母称为GPC。虽然也有直接翻译成凝胶渗透色谱的说法不过现在不太常用。自从1964年美国的J.Moore使用交联聚乙烯成功测定合成高分子的分子量分布开始,GPC就在合成高分子领域被广泛使用。在HPLC技术显著发展的今天,GPC是在疏水性高分子和高聚物分子量的分析过程中非常有效的方法。
     使用水溶液做流动相的情况,英语称为Gel Filtration Chromatography,取其首字母可以称为GFC,也有称为水系GPC的说法。另外,虽然也有直接翻译成凝胶过滤色谱的说法不过现在同样不太常用。GFC自从瑞典的J.Porath和P.Flodin使用交联葡聚糖成功进行蛋白质脱氯试验后就被广泛应用。交联葡聚糖填充的色谱柱至今仍有出售。其后随着填料的发展,越来越多使用不同种类的填料的色谱柱在生化学医药品领域得到广泛应用。
    由于此类专业术语使用起来错综复杂,所以做了如下总结
         ┌──流动相为有机溶剂:GPC (或称为油溶性SEC)
     SEC──┤
         └──流动相为水溶液:GFC (或称为水溶性SEC)

    1.GFC色谱柱
     GFC用的色谱柱分硅胶基质色谱柱和聚合物基质色谱柱。这两种做比较,硅胶色谱柱的校正曲线比较平缓,所以硅胶柱的分离性能比较好。然而,硅胶填料如果开大点的孔硅胶的结构会被破坏,所以就不能做成排除界限分子量大的凝胶。与此相对,聚合物的构造与硅胶相比更加坚固,可以开较大的孔。而且,聚合物填料的化学性质也比硅胶稳定,可以作为流动相使用的溶剂的选择范围非常广,这也是聚合物色谱柱的一个特点。
     硅胶柱可以用来分析以蛋白质为代表的糖蛋白,肽,核酸等物质。
    聚合物色谱柱,除了和硅胶柱同样的使用以外,还能用来进行硅胶柱不能测定的分子量大的水溶性超高分子的分子量测定。

    2.GPC色谱柱
      GPC(油性GPC)通常使用聚合物色谱柱。聚合物色谱柱最常用的填料是聚苯乙烯(准确的说应该是苯乙烯和二乙烯基苯的共聚物)。
     GPC分析的时候,首先必须选择能溶解样品的溶剂。GPC用的溶剂最常用的是THF(四氢呋喃)。如果THF能溶解样品的话那当然没问题,如果不能溶解的话就必须寻找能使之溶解的溶剂。除了THF,常用的GPC流动相还有氯仿,DMF(二甲基甲酰胺),HFIP(六氟异丙醇),喹啉,二氯苯,乙酸甲酯,四氯乙烷等。如果需使用的溶剂和色谱柱出厂的时候封存的溶剂不一致的话,首先,必须把色谱柱中的溶剂用流动相置换。一般来说就把能溶解样品的溶剂直接当成流动相来使用。

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  • 安平

    第4楼2021/12/15

    应助达人

    gpc和gfc 都属于SEC的分析方法。

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