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高效液相流动相含磷酸水,如何进行冲柱

  • Ins_3ec84f82
    2022/01/08
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 水相为0.1-0.3磷酸水,每次重新开机后先100%有机相和90%有机相各冲半小时活化柱子,之后就开始把纯水换成磷酸水平衡跑样品了,结束后换上纯水,10%有机相1.5h,90%有机相1h,最后100%有机相20min,这样做有问题吗?流速都是1ml/min
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  • Insm_603a714c

    第1楼2022/01/10

    一般色谱柱不要用纯水冲

    活化不需要这么久,改为原先时间的一半足以

    色谱柱的保存溶剂和洗柱溶剂可以根据色谱柱说明书来优化(有条件的话)

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  • 初心

    第2楼2022/01/10

    应助达人

    普通的色谱柱最好不要进纯水,建议直接10有机相冲洗

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  • valorb

    第3楼2022/01/10

    应该先用50%甲醇水冲洗,再关机

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  • Ins_3ec84f82

    第4楼2022/01/10

    没有纯水冲柱哦。我是在开机之后,先100%甲醇冲柱半小时,再是90%甲醇,也就是10%水冲半个小时。结束后也是分别用10% 90% 100% 甲醇来冲柱封柱的。

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  • Ins_3ec84f82

    第5楼2022/01/10

    因为我要用磷酸水,所以我都是在活化柱子时水相用纯水,之后再用磷酸水替换掉纯水的,结束跑样开始冲柱时也是重新把磷酸水换成水。

    Ins_3ec84f82(Ins_3ec84f82) 发表:没有纯水冲柱哦。我是在开机之后,先100%甲醇冲柱半小时,再是90%甲醇,也就是10%水冲半个小时。结束后也是分别用10% 90% 100% 甲醇来冲柱封柱的。

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  • dadgoh

    第6楼2022/01/11

    应助达人

    冲柱流速可降低一些,增加冲洗溶剂对填料的浸润作用。

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  • 有水有渝

    第7楼2022/01/12

    应助达人

    直接先用有机相和纯水分别排气,之后就开始把纯水换成磷酸水平衡跑样品了;实验结束后10%有机相1h,最后100%有机相45min,这样就可以了。如果下次分析有问题再延长清洗时间

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  • Ins_3ec84f82

    第8楼2022/01/13

    嗯嗯。那使用前不用活化柱子吗?而且我以为用酸之前和之后都要用10%有机相冲洗一段时间的?

    有水有渝(xky0230699) 发表:直接先用有机相和纯水分别排气,之后就开始把纯水换成磷酸水平衡跑样品了;实验结束后10%有机相1h,最后100%有机相45min,这样就可以了。如果下次分析有问题再延长清洗时间

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