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LC-MS 测生物胺标品,找不到相应样品的母离子

  • Ins_af5a9c33
    2022/04/11
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 各位大神帮忙解答一下疑惑,最近在做生物胺,建多巴胺,章鱼胺,酪胺和五羟色胺的方法,但是在scan时,首先做的是一级全扫,但这样都扫不到标准要求的母离子,请教一下这是什么情况,如何解决。

    液相仪器:赛默飞 U 3000,质谱:赛默飞 Q E,柱子是Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (2.1 x 100mm 2.7-Micron),液相条件和质谱条件不是参考于一个文献。液相参考文献里仪器和我所使用的的仪器型号一致,质谱方法是赛默飞工程师提供的,工程师用的质谱仪器是赛默飞Exploris 120.
    液相条件:(流动相:0.1%甲酸乙腈,0.1%甲酸水)
    梯度洗脱:0-1min:95甲酸水,1-12min:20%甲酸水,12-16min:20%甲酸水,16-20.4min:95%甲酸水,20.4-24.1min:5%甲酸水;
    流速0.2ml/min;柱温30℃;注射体积:10微升。
    质谱条件:


    喷雾电压(+/-):3500V/3200V;

    离子传输管温度:320℃;

    鞘气压力:40arb;

    辅助气压力10 arb;

    离子源温度:350℃。

    质谱扫描参数:

    扫描范围(Da):70-1050;

    Full Mass分辨率:120000,

    MS/MS分辨率:15000(这个准备做prm时参考)
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  • wuyuzegang

    第1楼2022/04/12

    应助达人

    可以参考一下国标GB5009.208-2016 食品安全国家标准 食品中生物胺的测定

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  • xiaolanzi5

    第2楼2022/04/12

    应助达人

    这几种生物胺的质谱条件都比较容易获得,正离子模式,找加氢母离子,做scan时没必要连柱子,接个二通即可,再找找试试。另外您的色谱条件好像有点问题,不知是不是笔误。

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  • hujiangtao

    第3楼2022/04/12

    应助达人

    生物胺含有氨基,从分子结构看容易形成正离子,一般找+1的准分子离子峰就可以,工程师给的质谱条件不是同一台仪器,最好用自己的仪器重新调谐质谱条件;不过生物胺类物质分子量较小,极性大,用反相c18柱子很难保留,最好用HILLIC模式正相柱子。

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  • Ins_af5a9c33

    第4楼2022/04/12

    谢谢你啊,不过我看过这个文件,这个文件里主要针对食品里的生物胺,用的是液相色谱法或者分光光度法。但我们学校这边只有液相质谱仪器可以使用。并且我做的是红火蚁大脑中的生物胺,一般用液质方法测生物胺的文献里没有说要衍生。

    wuyuzegang(dahua1981) 发表:可以参考一下国标GB5009.208-2016 食品安全国家标准 食品中生物胺的测定

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  • Ins_af5a9c33

    第5楼2022/04/12

    不接柱子的方法我后面也想尝试一下来着。
    scan加氢峰我找了,也找不到。是不是要考虑加k或者加na峰呢?
    另外,色谱条件我刚刚核对了下,除了95后面少个%外,其余没有写错,我参考了一篇文献里的方法,请问哪里可能有错误呢?
    我后面还想增加一下甲酸水的比例,不知道您觉得可行吗?

    xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:这几种生物胺的质谱条件都比较容易获得,正离子模式,找加氢母离子,做scan时没必要连柱子,接个二通即可,再找找试试。另外您的色谱条件好像有点问题,不知是不是笔误。

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  • Ins_af5a9c33

    第6楼2022/04/12

    我找的就是加氢峰,但是找不到,后面考虑看一下加na或者加k峰看看来着。
    质谱条件的话我后面尝试调一下看看。
    关于柱子我是这样考虑的,单个标准品溶液测不出来是不是与柱子无关啊?

    hujiangtao(hujiangtao) 发表:生物胺含有氨基,从分子结构看容易形成正离子,一般找+1的准分子离子峰就可以,工程师给的质谱条件不是同一台仪器,最好用自己的仪器重新调谐质谱条件;不过生物胺类物质分子量较小,极性大,用反相c18柱子很难保留,最好用HILLIC模式正相柱子。

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  • hujiangtao

    第7楼2022/04/13

    应助达人

    质谱参数调谐时无关,如果检测样品的话保留时间太短会有比较大的基质干扰

    Ins_af5a9c33(Ins_af5a9c33) 发表:我找的就是加氢峰,但是找不到,后面考虑看一下加na或者加k峰看看来着。
    质谱条件的话我后面尝试调一下看看。
    关于柱子我是这样考虑的,单个标准品溶液测不出来是不是与柱子无关啊?

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  • xiaolanzi5

    第8楼2022/04/13

    应助达人

    是啊,您先不用考虑色谱条件。先连二通找到母离子,做好mrm,再优化色谱条件。还有这几种物质分子量都小,您的扫描范围也太大了。

    Ins_af5a9c33(Ins_af5a9c33) 发表:不接柱子的方法我后面也想尝试一下来着。scan加氢峰我找了,也找不到。是不是要考虑加k或者加na峰呢?另外,色谱条件我刚刚核对了下,除了95后面少个%外,其余没有写错,我参考了一篇文献里的方法,请问哪里可能有错误呢?我后面还想增加一下甲酸水的比例,不知道您觉得可行吗?

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  • Ins_af5a9c33

    第9楼2022/04/13

    嗷嗷,好的,感谢

    hujiangtao(hujiangtao) 发表: 质谱参数调谐时无关,如果检测样品的话保留时间太短会有比较大的基质干扰

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  • Ins_af5a9c33

    第10楼2022/04/13

    好的,我后面不接柱子试试看,感谢

    xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:是啊,您先不用考虑色谱条件。先连二通找到母离子,做好mrm,再优化色谱条件。还有这几种物质分子量都小,您的扫描范围也太大了。

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