JOE HUI
第1楼2022/05/09
楼主可以参考如下资料:
首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要
使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很
高,适当调低流速。如果流动相中还有缓冲盐类,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,避免缓冲盐的析
出。
柱效检测: 流动相:10%乙酸乙酯+90%正己烷 流速1.0
标准溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯
检测波长254nm
这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时
与供应商沟通。
清
洗方法。
(1) 平时在正相条件下使用:
首先用50倍柱体积的异丙醇清洗,因异丙醇粘度较大需适当放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之
后,用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相,即可。
(2)平时在反相条件下使用:
缓冲盐应及时冲洗,不能直接用纯甲醇冲洗缓冲盐等,属常识就不作特别交待。
用50倍纯甲醇冲洗;之后,用异丙醇过渡后,用二氯甲烷冲洗色谱柱;之后,再用异丙醇过渡回来到
甲醇条件下。
这些清洗方法,主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法,色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等。