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【求助】求助!!! 紧急请教一个关于摩尔消光系数的问题!

生命科学仪器综合讨论

  • 小弟刚做酶活测试实验,方法如下:

    锰过氧化物酶(MnP) 活力测定[12 ,13 ] : 先将0.1mmol MnSO4 溶解于1 L 酒石酸缓冲液( 50mmol·L - 1 ,pH = 4.5) 中,再取0.8 mL 的该溶液和012mL 粗酶液混匀,即得1 mL 反应液. 在30 ℃下,往此反应液中加20μL H2O2 溶液(20 mmol·L - 1 ) 启动酶促反应,并在290 nm 波长下测定反应2 min 前后的反应液吸光度变化. 一个酶活力单位(U) 定义为每分钟氧化Mn2 + 产生1μmol Mn3 + 所需的酶量.

    但是在计算时需要知道摩尔消光系数,小弟查了很多资料都差不到,请问该方法中,290nm处的摩尔消光系数是多少???
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  • 闲鹤野云

    第1楼2007/07/19

    3.15.1 仪器校正:测定重铬酸钾溶液的摩尔消光系数,以求出使用仪器的校正因素:精密称取25mg经干燥的重铬酸钾(基准级)。用0.009mol/L硫酸溶解后准确稀释至200mL(相当于0.0004mol/L的溶液)。再吸取25mL此稀释液于50mL容量瓶中,加0.009mol/L硫酸稀释至刻度(相当于 0.0002mol/L溶液)。再吸取25mL此稀释液于50mL容量瓶中,加0.009mol/L硫酸稀释至刻度(相当于0.0001mol/L溶液)。用1cm石英杯,在最大吸收峰的波长处(接近350nm)用0.009mol/L硫酸作空白,测得以上三种不同浓度的摩尔溶液的吸光度。并按下式计算出以上三种浓度的摩尔消光系数的平均值。

    E1=A/m………………………………………………………………(1)




    式中:E1─—
    重铬酸钾溶液的摩尔消光系数;

    A──
    测得重铬酸钾溶液的吸光度;

    m──
    重铬酸钾溶液的摩尔浓度。


      再以此平均值与重铬酸钾的摩尔消光系数值3160比较,按下式求出使用仪器的校正因素。

    f=3160/M………………………………………………………………(2)




    式中:f──
    使用仪器的校正因素;

    M──
    测得重铬酸钾摩尔消光系数平均值。


      若f大于0.95或小于1.05,则使用仪器的校正因素可略而不计。

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  • 闲鹤野云

    第2楼2007/07/19

    http://www.bbioo.com/bio101/2006/7386.htm
    某些重要生物物质的消光系数

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  • Ins_1016bf56

    第3楼2024/03/15

    你好,解决了吗,请问是多少啊?

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