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请教磷酸盐流动相配置问题

  • Ins_3f6c1afd
    2022/06/28
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 最近做液相色谱需要用到磷酸盐buffer,自己看参考文献里面说的是30mM磷酸盐buffer PH2.3。我用的是磷酸二氢钾配的流动相,用磷酸调PH,只能调到2.5,后面再加磷酸也没有用了,老师说在不定容之前把PH先挑好,再定容,我觉得不可靠,问问大家有用过磷酸盐做流动相的嘛,怎么把PH调到2.3啊,不知道能不能用HCL。
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  • wuyuzegang

    第1楼2022/06/29

    应助达人

    试试这个方法:

    取0.03mol磷酸二氢钾(4.08g),加水溶解并稀释至1L,用磷酸调pH2.3。

    我认为应该首先调制溶液的PH,再定容。这样可以达到溶液体积的精确。加水定容几乎不会影响溶液的PH。


    用盐酸肯定是不行的

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  • sdlzkw007

    第2楼2022/06/29

    应助达人

    避免使用盐酸,卤素对仪器部件和不锈钢管路有腐蚀。先将磷酸盐溶解于500mL纯水中,用磷酸校正pH后,再用纯水稀释至1000mL。超声脱气后抽滤备用

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  • 检测老菜鸟

    第3楼2022/06/29

    应助达人

    最近做液相色谱需要用到磷酸盐buffer,自己看参考文献里面说的是30mM磷酸盐buffer PH2.3。我用的是磷酸二氢钾配的流动相,用磷酸调PH,只能调到2.5,后面再加磷酸也没有用了,老师说在不定容之前把PH先挑好,再定容,我觉得不可靠,问问大家有用过磷酸盐做流动相的嘛,怎么把PH调到2.3啊,不知道能不能用HCL。


    我记得以前还有课专门教缓冲盐的制作过程,低pH的制备一般有两种方法,一种是磷酸加水配成A液,磷酸二氢钾加水B液,A B混合。第二个就是算好加入量,磷酸,磷酸二氢钾,水的量,直接混合。

    Hcl可以用。少用。

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  • Ins_3f6c1afd

    第4楼2022/06/29

    感谢大佬,下次测的时候我按你的方法重新配一下

    wuyuzegang(dahua1981) 发表:试试这个方法:

    取0.03mol磷酸二氢钾(4.08g),加水溶解并稀释至1L,用磷酸调pH2.3。

    我认为应该首先调制溶液的PH,再定容。这样可以达到溶液体积的精确。加水定容几乎不会影响溶液的PH。


    用盐酸肯定是不行的

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  • Ins_3f6c1afd

    第5楼2022/06/29

    谢谢谢谢,下次我试一下嘿嘿

    sdlzkw007(sdlzkw007) 发表:避免使用盐酸,卤素对仪器部件和不锈钢管路有腐蚀。先将磷酸盐溶解于500mL纯水中,用磷酸校正pH后,再用纯水稀释至1000mL。超声脱气后抽滤备用

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  • Ins_3f6c1afd

    第6楼2022/06/29

    这个办法不太行,称4.08g磷酸二氢钾定容至1L,我用了快6毫升的85%磷酸才把PH调到2.3,这样下来,磷酸盐的浓度肯定远远大于0.03mol了,我看有直接用磷酸配磷酸盐缓冲液的,加4.45ml磷酸定容至2L。我自己用85%的磷酸试了,85%磷酸的摩尔浓度是14.63mol,配一升的话就是加2.05毫升磷酸,测了PH是2.44,虽然PH比参考文献高了,但是浓度就是0.03mol。

    wuyuzegang(dahua1981) 发表:试试这个方法:

    取0.03mol磷酸二氢钾(4.08g),加水溶解并稀释至1L,用磷酸调pH2.3。

    我认为应该首先调制溶液的PH,再定容。这样可以达到溶液体积的精确。加水定容几乎不会影响溶液的PH。


    用盐酸肯定是不行的

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  • wuyuzegang

    第7楼2022/06/29

    应助达人

    我理解磷酸盐的量就是0.03,加入的磷酸不能计入磷酸盐的含量,因为缓冲溶液需要存在一对互变体,不能只存在一种形态。

    Ins_3f6c1afd(Ins_3f6c1afd) 发表: 这个办法不太行,称4.08g磷酸二氢钾定容至1L,我用了快6毫升的85%磷酸才把PH调到2.3,这样下来,磷酸盐的浓度肯定远远大于0.03mol了,我看有直接用磷酸配磷酸盐缓冲液的,加4.45ml磷酸定容至2L。我自己用85%的磷酸试了,85%磷酸的摩尔浓度是14.63mol,配一升的话就是加2.05毫升磷酸,测了PH是2.44,虽然PH比参考文献高了,但是浓度就是0.03mol。

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  • Ins_3f6c1afd

    第8楼2022/06/29

    感谢感谢,我先用磷酸跑一下试试,看看能不能出参考文献的峰,如何再换成磷酸盐

    wuyuzegang(dahua1981) 发表:我理解磷酸盐的量就是0.03,加入的磷酸不能计入磷酸盐的含量,因为缓冲溶液需要存在一对互变体,不能只存在一种形态。

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  • Ins_3f6c1afd

    第9楼2022/06/30

    大佬,我觉得还是不行,今天我有换了一个参考文献,因为他用的柱子型号和我们实验室的一样,他的流动相是磷酸钾缓冲液,我配了30mM的磷酸钾,如何用磷酸调PH,我一共加了15ml才把PH调到2.3,因为我检测的物质需要酸性条件。加了15ml磷酸我蒙了,觉得应该不是用磷酸调PH,具体用啥调我也不知道了,不知道实验咋做了哎

    wuyuzegang(dahua1981) 发表:试试这个方法:

    取0.03mol磷酸二氢钾(4.08g),加水溶解并稀释至1L,用磷酸调pH2.3。

    我认为应该首先调制溶液的PH,再定容。这样可以达到溶液体积的精确。加水定容几乎不会影响溶液的PH。


    用盐酸肯定是不行的

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  • Ins_3f6c1afd

    第10楼2022/06/30

    还有我在网上看见的,说磷酸盐缓冲液的浓度是指磷酸根的浓度,而不是金属离子的浓度

    wuyuzegang(dahua1981) 发表:我理解磷酸盐的量就是0.03,加入的磷酸不能计入磷酸盐的含量,因为缓冲溶液需要存在一对互变体,不能只存在一种形态。

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