做液相色谱，为什么同一物质的出峰时间会相差零点几分钟

应助达人

1、色谱柱可能被污染堵塞；
2、柱流量有波动；
3、柱温有变化；
4、流动相极性或pH变化；
5、流动相比例变化
6、待测样品变化

应助达人

不一定是样品不同导致的，这种表述可能会让人想到基质效应。当然也有可能，所以要确定是不是，要观察同一样品多次进样后的时间重复性。
平衡的话建议把方法贴出来，一般有2-5分钟平衡就足够了。

应助达人

请确定是等度洗脱还是梯度洗脱，如果是梯度洗脱请核查梯度洗脱的准确性，可以参考一下液相色谱仪检定规程中的章节。不论哪一种情况下，请先确认仪器测试的重复性，不管是标准溶液还是基质加标，都没有问题了即可。

应助达人

1）柱子用流动相平衡时间不够，建议多平衡一会
2）流动相组成发生变化，建议重新配缓冲液
3）流速不稳，重新设定流速，必要时需要对泵进行一次维护
4）柱子不行

应助达人

流动相组成发生变化,混有气泡，混合比例阀残留气泡等

如果对照品是这样，那就是机子没平衡好。
如果是样品这样，那就是基质效应。但一般不应该相差这么大。一般相差0.1 min就是很大了。通常情况下相差应在0.05 min以内。也就是3秒以内。

第一次发帖，没想到这么多人回复，就在这统一感谢一下大家，谢谢大家解惑，我觉得应该是柱子没有平衡好，下次做的时候我多平衡一会柱子，再看看结果

应助达人

楼主具体分析什么样品？详细说明具体的分析条件为好。

其他组分或者溶剂的保留时间是否稳定？如果是这样的话，那么建议考虑分析方法问题。是否系统未能完全平衡，建议延长进样时间的间隔。

此外考虑是否流动相梯度最终的洗脱强度不足，不能充分洗脱样品中的杂质，建议修改梯度程序，提高梯度的最终洗脱强度和保持时间。