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体外抑制蔗糖酶活性,求老师指导指导,感恩,

  • 明明33895
    2022/11/02
  • 私聊

生物制药

  • 根据文献等比例缩小体积,全部的反应均在96孔板上反应,先加入10μL底物(2%蔗糖溶液),后加入各浓度梯度的样品溶液20μL,反应5min后,加入蔗糖酶溶液10μL,反应20min后,加入无水乙醇20μL灭酶,灭酶后加入20μLDNS,最后用pbs稀释测定吸光度。
    (1)蔗糖酶用的是来自酵母菌的,我看文献用的都是鼠小肠里的
    (2)蔗糖酶一开始用的20U/mL,DNS测定后吸光度太大,且各个样品几乎没有抑制率,今天换2U/mL,样品和阿卡波糖均几乎没有抑制率。
    (3)究竟DNS测定这个是否存在问题,求老师指导。
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