【仪器心得】Waters Acquity UPLC使用心得

Waters Acquity UPLC使用心得

Waters Acquity UPLC是单位于2009年购置的，第一次使用超高效液相色谱，被超快速的分析时间震撼了。例如原来牛奶中糠氨酸检测一直用Waters 2695，糠氨酸极性强，10min左右就出峰了，但梯度程序却要运行时间40 min，因为要把牛奶中保留性强的基质洗脱干净不然会影响下一针样品，还要加上几分钟平衡时间；而UPLC 8 min梯度程序就可以搞定，分离度比2695还要好一些，大大提高了工作效率，节省流动相试剂，特别适合大批量样品检测。

与传统HPLC相比，UPLC最大的优点就是快速、分离度好，以前建立、优化一个液相方法可能需要几天（多组分单针运行时间一般都需要几十分钟），UPLC多数半天就可以搞定（多组分梯度程序一般10 min都可以搞定），这主要得益于整个液相耐高压系统（该仪器可耐受15000 PSI）和亚2 um粒径填料色谱柱的高塔板数。但随之带来的问题是这种色谱柱特别容易堵，特别是像含蛋白、脂肪、磷脂等基质多的样品，有次接到几百批次大豆中大豆异黄酮检测任务，尽管前处理时样品已经经过C18 SPE小柱净化，然而进样不到一百次就发现系统压力超过15000 PSI，打开色谱柱前端发现筛板上存在明显油脂痕迹，应该是导致系统超压的主要原因，换新筛板后压力明显下降，但分离效果也出现一定程度下降，基本做完这几百个样品柱子就不能使用了，可见亚2 um色谱柱抗污染能力确实比普通5 um柱子差一些，而且UPLC单根色谱柱价格也要比HPLC贵不少。

所以对于预算充足、样品量很大的单位UPLC可以大幅提高工作效率，但从成本-效益角度考虑，普通HPLC更适合像企业内部实验室等需要严格核算投入-产出比例的实验室，因为UPLC能分析的组分普通HPLC也完全能够胜任，只不过需要的分析检测时间长一些、流动相消耗多一些。