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实验结束后色谱柱清洗疑问

  • guoguoguog
    2023/01/04
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 实验结束后色谱柱清洗

    如果使用的流动相不涉及缓冲盐、有机酸或无机酸等添加物,可以直接用纯有机相冲洗,并将色谱柱内充满有机相并封存。

    如果使用的流动相含有缓冲盐、有机酸或无机酸等添加物,需要用高比例的水相(如甲醇:水=90:10)冲洗色谱柱30min以上,然后用纯有机相冲洗色谱柱,并将色谱柱内充满有机相并封存。

    以上摘自《液相色谱实战宝典》

    有几个疑问需要咨询一下,恳请各位大神给予解答:

    我使用的色谱柱: C18 150mmX4.6mm

    液相色谱型号:北京温分LC98I

    1、上面提到的“冲洗”是需要将色谱柱出口端卸下,断开检测器吗?

    2、高比例水相冲洗过后,纯有机相冲洗色谱柱,这个纯有机相冲洗有没有时间要求?
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  • 歌名

    第1楼2023/01/04

    应助达人

    、上面提到的“冲洗”是需要将色谱柱出口端卸下,断开检测器吗?--------------------------------不用断开,只需要更换流动相连着一起冲洗即可
    2、高比例水相冲洗过后,纯有机相冲洗色谱柱,这个纯有机相冲洗有没有时间要求?------------------------------------------没有时间上的硬性要求,要求有两点,一是尽可能的使色谱柱充满有机相,二是尽可能的将色谱柱内残留物冲洗出来。
    顺带提一下高水相、高有机相冲洗时间都是不定的要根据具体的实际情况来做,例如色谱柱柱长、粒径、进样样品类型、化合物等,宝典里的30min只是个参考值

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  • guoguoguog

    第2楼2023/01/04

    好的,谢谢

    歌名(Ins_eedcdc41) 发表:、上面提到的“冲洗”是需要将色谱柱出口端卸下,断开检测器吗?--------------------------------不用断开,只需要更换流动相连着一起冲洗即可
    2、高比例水相冲洗过后,纯有机相冲洗色谱柱,这个纯有机相冲洗有没有时间要求?------------------------------------------没有时间上的硬性要求,要求有两点,一是尽可能的使色谱柱充满有机相,二是尽可能的将色谱柱内残留物冲洗出来。
    顺带提一下高水相、高有机相冲洗时间都是不定的要根据具体的实际情况来做,例如色谱柱柱长、粒径、进样样品类型、化合物等,宝典里的30min只是个参考值

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  • houjjun

    第3楼2023/01/04

    “冲洗”时不用断开与检测器连接,断开是防止有严重的污染物冲出来污染检测器,这个污染物能有多严重,即使能从色谱柱冲出来,就不会污染到检测器。
    冲洗时间没有具体要求,一般二三十分钟,具体得看冲洗情况,如果第二天或近期还使用,少冲洗一会也行,如果较长时间不会用最好多冲洗一会,保证色谱柱内的残留物完全冲洗出来

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  • xiaolanzi5

    第4楼2023/01/04

    应助达人

    严格讲高水相冲洗时不必断开检测器,因为从柱子到检测器这段还有初始流动相(缓冲盐)。高有机相冲洗时还是建议切换到废液。高有机相一般冲洗20-30个柱体积时间,至于一个柱体积多长时间,我一般根据溶剂峰的时间来粗略判断,在一定流速下,把溶剂出峰时间看作一个柱体积时间。

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  • xx_dxd_xx

    第6楼2023/01/07

    纯甲醇冲洗的时间不定,与样品脏不脏有关,一般说的二十到三十分钟只是参考。我习惯开着检测器冲,观察基线,基线平就是冲干净了

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  • Emp丶

    第7楼2023/02/09

    高比例的水相写反了吧,甲醇:水=10:90吧?90%甲醇,有盐的话柱子不就堵了?

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  • 液相色谱柱修复

    第8楼2024/05/28

    先用10:90,后用90:10比较合适

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