【征文】征集超高效液相色谱仪使用心得

整体分析效果更高，灵敏度高，但是柱子的粒径小，更容易堵塞，所以前处理要求就更加严格。而且仪器损耗较大，相对寿命要HPLC短。

能不能写得详细点。

UPLC具有以下优点。
　　一、超高分离度
　　UPLC发挥了1.7 μm颗粒提供柱效增高的全部优越性。尤其是1.7μm颗粒提供的柱效比5μm颗粒提高了3倍。因为分离度与粒度的平方根成反比，1.7 μm颗粒的分离度比5μm颗粒提高了70％。在梯度分离中也具有同样的优越性，此时分离能力用峰容量衡量。
　　UPLC用1.7μm颗粒提高了分离能力，可以分离出更多的色谱峰，从而对样品提供的信息达到了一个新的水平。而且又最大地缩短了开发方法所需的时间。
　　二、超高速度
　　由于UPLC系统用1.7μm颗粒，柱长可以比用5μm颗粒时缩短3倍而保持柱效不变，而且使分离在高3倍的流速下进行，结果使分离过程快了多倍而分离度保持不变。其快速分析亦节省了以往一向耗时的方法认证的时间，使方法认证变得简单快速。
　　三、超高灵敏度
　　UPLC使用小颗粒技术可以得到更高的柱效（因而改善了分离度）、更窄的色谱峰宽，即更高的灵敏度。因为色谱峰变得更窄，峰高也就更高了；同样，当UPLC用于快速分析、用较短色谱柱而使柱效不变时，色谱峰高会相应增加。因此，使用UPLC技术，不仅可以在保持与HPLC相同分离度时提高峰高，而且在改善分离度的同时亦可提高峰高即灵敏度。

UPLC具有以下优点。
　　一、超高分离度
　　UPLC发挥了1.7 μm颗粒提供柱效增高的全部优越性。尤其是1.7μm颗粒提供的柱效比5μm颗粒提高了3倍。因为分离度与粒度的平方根成反比，1.7 μm颗粒的分离度比5μm颗粒提高了70％。在梯度分离中也具有同样的优越性，此时分离能力用峰容量衡量。
　　UPLC用1.7μm颗粒提高了分离能力，可以分离出更多的色谱峰，从而对样品提供的信息达到了一个新的水平。而且又最大地缩短了开发方法所需的时间。
　　二、超高速度
　　由于UPLC系统用1.7μm颗粒，柱长可以比用5μm颗粒时缩短3倍而保持柱效不变，而且使分离在高3倍的流速下进行，结果使分离过程快了多倍而分离度保持不变。其快速分析亦节省了以往一向耗时的方法认证的时间，使方法认证变得简单快速。
　　三、超高灵敏度
　　UPLC使用小颗粒技术可以得到更高的柱效（因而改善了分离度）、更窄的色谱峰宽，即更高的灵敏度。因为色谱峰变得更窄，峰高也就更高了；同样，当UPLC用于快速分析、用较短色谱柱而使柱效不变时，色谱峰高会相应增加。因此，使用UPLC技术，不仅可以在保持与HPLC相同分离度时提高峰高，而且在改善分离度的同时亦可提高峰高即灵敏度。

哈哈，北京龙智达公司代理的日本TOSOH的半微量GPC，在只使用0.3ml的流速，可以快速测定大分子分子量，实现了不降低柱效，加快分析时间，不仅节省溶剂，减少对环境污染，而且操作方便，仪器一体化设计，全部在恒温系统中，使系统更稳定。具有waters及agilent等厂商不能比拟的优势。我觉得从环保和性能上更应该推行这种半微量的仪器，希望各大厂商能推出半微量的超高效液相色谱。

岛 津 Prominece UFLC(UltraFast Liquid Chromatography)
* 维持分离度的同时实现快速分析
* 维持基本性能的同时实现快速分析
* 低成本实现快速分析

UFLC的超快速分析主要是通过两个手段缩短分析时间。
一是使用小颗粒的柱子，2.2um.Shim-pack XR-ODS柱。根据Van Deemter方程，颗粒越小，在同样的线性速率下，柱效越高。所以与传统的5um柱子相比，柱子的长度可以缩短，分析时间也缩短。
二是提高温度。因为过小的颗粒，会使压力上升很多，带来很多负面后果，比如说易漏液，或者缩短一些部件的寿命，或者因为柱子内部因压力而产生的热效应使得保留时间的重现性不好。提高温度，使柱压大大降低。

UPLC——超高效液相色谱，这是waters公司的专利，目前仅有它生产此类型的仪器。超高效，简而言之就是分离效率大大提高，我认为分离效率高主要是因为他们的色谱柱使用了1.7um粒径的填料，根据范-迪米特方程，粒径小到一定程度柱效将不随流速的增加而减小。为了适应小粒径的色谱柱，waters公司依靠自身的优势，把泵和整个色谱系统的压力提高到15000psi，这样可以保证在低流速的条件下，柱压在允许的范围内波动而分离效果良好（根据waters公司的工程师介绍，柱压在8000—10000psi工作压力下，仪器使用效果最佳，这点我还是不太明白其中的原因）。
在使用超高效液相的过程中，我个人认为它有以下几个优势：
1、分离时间大大缩短；
2、峰完全分离的情况下，各组分峰的峰形良好，对称因子在1左右；
3、色谱柱在正用时，如果柱效降低，我们可以将其反用，分离效果依然良好；
4、waters公司生产的与超高效液相匹配的色谱柱，可以使用较高比例的水相作为流动相，不会减少柱子的寿命。
希望各位在使用超高效液相时，能够充分发现其优点，为我们所用。

我们最近买回来的岛津的UFLC和以前的LC20，我感觉并没有多大的差别。