【讨论】不知道大家有没有遇到这种情况

看得不是很明白，既然是等度，什么叫做“流动相在一定范围内比例变化1%”，如何变化？保留时间产生变化的原因可能是柱温／流动相／样品的原因，可以分别排除，但是，变化这么大范围还是觉得不正常。

我觉得你说得也不太清楚

但我遇到过这样的事情，在制备的时候，改变1%的比例，会使保留时间改变很多，还有就是上样量和仪器的稳定性都回影响的。

不知是否着这个意思

不好意思阿，我的意思是每一针都走等度，但是同一天同一样品按不同的流动相比例等度走针

流动相的PH值对保留时间影响很大的，是不是PH的影响？

你可以先测一下流动相的pH值，pH值的影响并不是针对所有的样品的。做别的样品有没有这样的情况？另外可以考虑一下色谱柱，试着换一家的色谱柱。

柱子润洗时间多长,把柱子再润洗30分钟看看

你用的是双泵吗？还是混好了再用单泵做的？
流动相比例不同，特别是PH值不同，保留时间会相差很大的。

不会差几分钟那么多如果用甲醇和水的话吧!!

1.流动相超声的时间是不是太短！
2.看看仪器是不是有什么变化或者说泵有没有毛病！
3.为什么你的流动相有1%比例变化呢？不明白！是不是密封不好，有机溶媒挥发了！