如何使用液氮研磨组织？

应助达人

液氮研磨就是让样品在低温下冷冻，冷冻温度要达到很低，然后样品就会被冻的很脆，这种情况下再进行研磨就会容易一些。楼主你可以试着冷冻时间久一点，把温度降到极致

应助达人

液氮研磨步骤：

　　1、将研钵从烘箱内拿出，用专用容器盛一些液氮备用；

　　2、将液氮小心加入并浸满研钵，浸泡预冷研杵与研钵(加入液氮时，缓慢加入，防止液氮飞溅)；

　　3、当第一次加入的液氮挥发*后，立即向研钵中缓慢加入约1/2研钵体积的液氮(若组织块较大或较多的情况下可浸满研钵)，将组织迅速转移至液氮内，确保组织全部浸没在液氮中；

　　4、使用研杵在液氮中轻轻敲打组织，将组织打碎成小块，要注意切勿用力过度，要防止组织块飞溅出研钵；在液氮即将挥发完时，使用研杵对组织样本进行碾压研磨(注意，若为植物样本可直接用研杵碾压组织)；

　　5、待液氮挥发完后，立即加入1/3研钵体积的液氮(注意，加入液氮速度要缓慢，切勿使得液氮冲击力过大，将组织样本冲出研钵)，迅速用研杵研磨组织，根据组织状态的变化程度，在确保组织始终处于冰冻状态下，及时补充液氮进行研磨，(一般30s~1min补充一次，至少需要补充3次以上)，直至组织被研磨成粉末状。

　　6、当组织研磨成粉末状后立即加入合适体积的裂解液进行组织裂解，若裂解液冻于研钵内壁，用研杵轻轻敲击下来，继续研磨让组织粉末与裂解液充分混合，研磨成糊状后进行下一个样本的取样操作；

　　7、静置至样本和裂解液混合物融化，将已经融化成液体状态的样本转移至离心管中，插入冰块上暂存。

这里的裂解液指的是什么呢？是我要用来提取代谢物的提取液吗？甲醇和水？

这样可以将样品研磨成干燥的粉末吗？研磨完成之后是不是直接取样加入提取液提取了？

代谢组学的话，也可以冷冻匀浆，样品体积越小越好，如果要研究不同部位的组织，可以先匀浆再取样

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直接冷冻匀浆然后加提取液提取？这样会受样品中的水分影响吗？

直接提取就好了，提取溶剂里面不是也有水吗，提取完之后真空冷冻干燥，然后再复溶上机就好，如果定量的话，计算的也是每mg样品中（总重）有多少ug/ng/pg的某种代谢物。