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液相色谱仪的使用注意事项

王熊猫君

2023/09/05

液相色谱（LC）

仪器：最重要的是仪器的检定/校准。使用前确保仪器在有效期内正常运行，可以进行期间核查来保证仪器的正常运行状态。

色谱条件：

a.水要求用超纯水或一级水，试剂要求色谱级别。

b.色谱柱：根据说明书进行使用和清洗，特别注意避免纯水相造成色谱柱塌陷、柱效下降和色谱柱使用寿命缩短等危害。

c.检测器：注意观察检测器氘灯能量的变化，比如基线波动大，响应值突然变小等，都有可能是氘灯的能量不足所引起的，需要根据实际情况进行更换。

环境：液相色谱仪应安装于水平、远离振动、电磁干扰的室内台面上，保持温度、湿度在仪器要求的范围内。

人员：认真学习液相的说明书，掌握液相硬件和软件的操作，掌握日常的维护保养，掌握最基础故障的排除和维修。

重点关注：

1.液相色谱使用前

a.流动相使用与储存：有机相（色谱纯）密封，避光保存。盐溶液现用现配，防止长时间使用，微生物生长堵塞吸滤器，影响液相色谱系统的正常运行。

b.流动相过滤：杂质微粒会磨损柱塞杆、密封圈、单向阀等。可采用抽滤装置过滤，过滤装置应及时清洗。

C.流动相排气：流动相中气泡会引起泵输液不畅和检测器产生噪声和漂移。流动相使用前超声排气，仪器准备时打开排液阀，使用注射器吸液排除气泡。

2.液相色谱使用中

a.流动相走空：泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转会磨损柱塞杆、缸体和密封圈，造成漏液。

b.漏液与堵塞：检查色谱柱、管路、接头是否漏液，仪器运行压力是否正常。

c.废液排放及储存：注意排废管路流通正常，无漏液，废液桶标识清晰。

3.液相色谱使用后

a.清洗色谱系统：含有缓冲盐液的流动相在停泵长时间后可能析出盐的微细晶体，这些晶体将和固体微粒一样损坏密封圈和柱塞杆等。因此，必须使用大比例水相将泵及仪器管路充分清洗后，再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的有机溶剂（可以是甲醇或甲醇-水）。

b.仪器长期不用：将滤头浸泡在甲醇里，色谱柱用有机相保存，堵头密封。

总结：需要特别指出的是——液相的日常维护保养很重要，比如流动相的过滤、脱气、泵密封圈的清洗、系统管路的清洗、溶剂过滤头的清洗等，倘若不坚持，很容易导致色谱柱堵塞、系统压力过大、色谱峰异常等不必要的故障，浪费时间。操作人员在配制液相分析用样品溶液时，最好由同一个人单独完成，以免不必要的偶然误差。

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