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0.1%TFA走基线一直走不平

  • Ins_a8f2390a
    2023/09/11
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 我用的流动相是0.1%TFA与纯乙腈,反相液相色谱,C18,最近在尝试着跑样品的时候发现,在用含有0.1%TFA:乙腈=90:10跑基线的时候,总是跑不平,最久跑了2小时。目前确认不是检测器,流动相的问题。
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  • 通标小菜鸟

    第1楼2023/09/12

    应助达人

    楼主是等度还是梯度?流动相配制好后最后超声脱气5分钟左右,然后装上仪器,进行管路灌注排气泡,排完气泡后平衡仪器,观察泵压力变化

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  • 通标小菜鸟

    第2楼2023/09/12

    应助达人

    还有如果楼主用的是等度,那可以将流动相都配在一起,90%乙腈加10%水,然后再加入千分之一的三氟乙酸,用单通道走,这样做的目的是排除是否是比例阀那边的问题

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  • Ins_a8f2390a

    第3楼2023/09/12

    我就在跑平衡那里就卡住了,后续应该也也不会走等梯度

    通标小菜鸟(v3141805) 发表:楼主是等度还是梯度?流动相配制好后最后超声脱气5分钟左右,然后装上仪器,进行管路灌注排气泡,排完气泡后平衡仪器,观察泵压力变化

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  • Ins_a8f2390a

    第4楼2023/09/12

    我都是抽滤之后超声30min,泵压力应该没问题,因为单独走乙腈或甲醇,90%超纯水:10%乙腈或甲醇也不会有问题,但是只要一加入0.1%TFA它基线就是走不平

    通标小菜鸟(v3141805) 发表:楼主是等度还是梯度?流动相配制好后最后超声脱气5分钟左右,然后装上仪器,进行管路灌注排气泡,排完气泡后平衡仪器,观察泵压力变化

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  • 安平

    第5楼2023/09/13

    应助达人

    有图么?什么检测器?

    用纯甲醇做流动相时,基线是否稳定?

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  • Ins_a8f2390a

    第6楼2023/09/13

    把乙腈替换成甲醇的时候也同样的问题

    安平(byron1111) 发表:有图么?什么检测器?用纯甲醇做流动相时,基线是否稳定?

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  • Ins_a8f2390a

    第7楼2023/09/13

    紫外检测,215nm,目前我在想是不是有可能是0.1%TFA的PH太低了,我的柱子用的是Eclipse plus C18,它的PH为2-9

    安平(byron1111) 发表:有图么?什么检测器?用纯甲醇做流动相时,基线是否稳定?

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  • Ins_a8f2390a

    第8楼2023/09/13

    但是波长换成280的时候,基线就很平

    Ins_a8f2390a(Ins_a8f2390a) 发表:紫外检测,215nm,目前我在想是不是有可能是0.1%TFA的PH太低了,我的柱子用的是Eclipse plus C18,它的PH为2-9

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  • jsrdwwj

    第10楼2023/09/20

    建议降低TFA浓度,或者更换乙酸试试。

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