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求助,关于IEX-HPLC分离质粒构型

  • Ins_89ae1b95
    2023/09/22
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 用的是东曹的DNA-NPR柱子,4.6 × 7.5,分离构型不同的同种质粒,做的加标,条件如下。
    但是做出来的叠图是这样,OC型和模板,也就是L型完全分不开。

    调整了一下洗脱程序,出峰那一段几乎是等度了,结果还是分不开,是不是这种情况就没有办法了?好像这版里很少有同行做这个,有热心大神能指点一下吗?

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  • 通标小菜鸟

    第1楼2023/09/23

    应助达人

    楼主做的确实比较小众,网上有一篇文章,也是东曹发布的,用的是楼主这根柱子对质粒DNA的分离,这应该是厂商的应用文章。不过从色谱图上看,分离度及出峰其实也不好。楼主可以咨询一下该厂家的应用工程师,让他们根据你们的需求给出一个解决方案。当然生产该类型色谱柱的肯定不止他们一家,楼主也还可以问问安捷伦,waters等液相色谱柱生产厂商,有没有类似的应用案例进行参考。

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  • Ins_89ae1b95

    第2楼2023/09/23

    哈哈,感谢建议,我是学环境工程的,新换的工作是做这个,我想请教的是,假如说像这种不断放缓梯度,已经快接近等度,但是还没有分开,是不是就基本可以放弃,只能换其它柱子或者换流动相体系了?

    通标小菜鸟(v3141805) 发表:楼主做的确实比较小众,网上有一篇文章,也是东曹发布的,用的是楼主这根柱子对质粒DNA的分离,这应该是厂商的应用文章。不过从色谱图上看,分离度及出峰其实也不好。楼主可以咨询一下该厂家的应用工程师,让他们根据你们的需求给出一个解决方案。当然生产该类型色谱柱的肯定不止他们一家,楼主也还可以问问安捷伦,waters等液相色谱柱生产厂商,有没有类似的应用案例进行参考。

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  • 通标小菜鸟

    第3楼2023/09/24

    应助达人

    哈哈,我也是环境的。其实还有柱温和流速也是优化的方向,但是楼主的实际分离度基本上看不出来,所以优化着两个参数估计效果也不明显。

    Ins_89ae1b95(Ins_89ae1b95) 发表: 哈哈,感谢建议,我是学环境工程的,新换的工作是做这个,我想请教的是,假如说像这种不断放缓梯度,已经快接近等度,但是还没有分开,是不是就基本可以放弃,只能换其它柱子或者换流动相体系了?

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