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HPLC氨基酸检测谱图出现鼓包是什么原因

  • rainmanstd
    2023/10/04
    • 私聊

液相色谱（LC）

  • 新手第一次做氨基酸检测，经验不足，谱图中出现鼓包（红圈部分），不知是什么原因，还请各位老师指导
    岛津HPLC测定17种游离氨基酸
    色谱条件：C18色谱柱
    流动相：A相：20mM NaH2PO4与20mM Na2HPO4
    B相：ACN：CH3OH：H2O = 45:40:15
    柱温：40℃
    流速：0.4mL/min
    波长：254nm
    梯度洗脱见表
    时间(Min)%A%B
    0955
    10919
    208911
    217021
    347723
    357525
    436832
    442080
    491090
    50955
    53955
    衍生操作：0.5mL硼酸妍缓冲液+0.1mL提取液，涡旋振荡20S，+0.1mL邻苯二甲醛（OPA）衍生液，涡旋振荡20S。
    仪器谱图：

    查了各种文献，谱图中都没有鼓包，不知出现鼓包是什么原因呢?
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  • myoldid

    第1楼2023/10/07

    应助达人

    先把流动相重新配一边吧，感觉污染还是来自于流动相，也可以先进一个空白看看。翻看了下安捷伦的应用文集，他们的图上也有一个杂峰，只是没你这个宽



    附上条件

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