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紫外分光光度法测定吸光度制作标准曲线，斜率过大

Ins_bc37ebf2

2024/02/23

紫外可见分光光度计（UV）

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悬赏金额:10积分状态:未解决

精密称取对照品5.0 mg于50 mL容量瓶中，去离子水溶解并定容至刻度，得到质量浓度为0.1mg/mL对照品溶液。分别吸取0.5mL、0.75mL、1 mL、1.25mL、1.5mL没食子酸对照品溶液，置于25mL容量瓶中，加入Folin- Ciocalteu试剂2.5mL，摇匀，加入7%碳酸钠溶液6.25mL，蒸馏水定容，70°C水浴反应40min，采用紫外分光光度法，在波长760nm处测定吸光度值。以没食子酸质量浓度为横坐标(X)，吸光度值为纵坐标(Y)绘制标准曲线，得到标准曲线回归方程为R2三个九以上，但是斜率过大，这个是什么原因，做了四次实验了，还是这样大。怎么解决？

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ztyzb

第1楼2024/02/23

应助达人

1、楼主没扣除空白吗？考虑是纯水或者试剂的影响；2、建议自行配制标准品用有证标准物质验证准确度，有可能是配制标准溶液本身的问题。

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sdlzkw007

第2楼2024/02/23

应助达人

根据你的标准曲线推测，空白的吸光度有点儿高，建议你排查一下试剂、器皿，控制好空白的吸光度再对比一下

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Ins_c1868a4e

第3楼2024/02/23

紫外分光光度

0

夕阳

第4楼2024/02/25

应助达人

工作曲线的线性（斜率）很好啊！只是空白（本底）太高了。

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Ins_bc37ebf2

第5楼2024/03/03

谢谢大佬!因为可能也是我个人操作问题，已经排除了试剂，仪器干扰，空白组也已做，还是没办法做好这个标曲，所以换了其他文献参考做标曲，谢谢大佬们提的建议!
ztyzb(zxz19900120) 发表:1、楼主没扣除空白吗？考虑是纯水或者试剂的影响；2、建议自行配制标准品用有证标准物质验证准确度，有可能是配制标准溶液本身的问题。

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Ins_bc37ebf2

第6楼2024/03/03

谢谢大佬!因为可能也是我个人操作问题，已经排除了试剂，仪器干扰，空白组也已做，还是没办法做好这个标曲，所以换了其他文献参考做标曲，谢谢大佬们提的建议!
sdlzkw007(sdlzkw007) 发表:根据你的标准曲线推测，空白的吸光度有点儿高，建议你排查一下试剂、器皿，控制好空白的吸光度再对比一下

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