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液相梯度洗脱流速问题

  • Ins_f7ddbd9c
    2024/05/30
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 我这台液相是安捷伦1100,用的梯度的话是50-90%的乙腈/缓冲液,最近几天进样时发现压力经常剧烈波动,排查了一下发现在初始50%乙腈下流速正常,但是在80%乙腈以上时,流速逐渐下降,并且压力波动增大,而且此后梯度恢复初始50%时压力和流速也很难恢复正常。打开purge阀大流速冲洗一下能部分恢复流速和压力。因为这台机子比较老,而且我也不是分析专业的,有没有懂行的能指点一下
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  • 完全小白

    第1楼2024/05/30

    单向阀黏住了

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  • sdzb1982

    第2楼2024/05/30

    应助达人

    1、乙腈效应,比例高了单向阀失效。
    2、考虑是不是缓冲盐浓度过高,在高有机相下,有部分盐析出,细小颗影响宝石球的闭合。


    超声一下单向阀的阀芯,确认一下你缓冲盐的浓度。

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  • smart123

    第3楼2024/05/31

    拆下色谱柱,上两通,维护一下仪器流路,排查是否有色谱柱的原因??

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  • 液相色谱柱修复

    第4楼2024/05/31

    缓冲盐还要用90比例的乙腈?

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  • Serena921

    第5楼2024/05/31

    1.新方法的话注意缓冲盐浓度; 2.成熟的方法看下最新批次的乙腈有没有问题,换个质量好点品牌的乙腈3.单向阀也要先超声后看下有没有问题,有问题更换单向阀

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  • Ins_f7ddbd9c

    第6楼2024/05/31

    那我是入口和出口单向阀都需要超声吗

    smart123(smart123) 发表:拆下色谱柱,上两通,维护一下仪器流路,排查是否有色谱柱的原因??

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  • smart123

    第7楼2024/05/31

    沟通工程师一下,处理一下单向阀,流速不稳可能是多个部件的共同影响。我做过食品检测,用液相7年,没遇到同样问题,压力波动液会有,但是都没超过单向阀。

    Ins_f7ddbd9c(Ins_f7ddbd9c) 发表: 那我是入口和出口单向阀都需要超声吗

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  • sdzb1982

    第8楼2024/05/31

    应助达人

    以我判断盐析的问题可能性最大,因为你低有机相时,是没有问题的,只有有机相达到90%,才出现这个问题。
    只是你盐析的不是很严重,没彻底堵死管路,只是少量盐晶颗粒,影响宝石球(宝石球由于盐晶颗粒的影响,不能完全和底座密封,就出有少量液体回流,所以就会出现压力波动。

    你这方法看起来是不像是标准方法,是自己开发的吗?能方便说一下是什么缓冲盐,浓度有多大吗?


    1、你可以适当降低盐的浓度。
    2、也可以在乙腈中加5%-10%的水,不要用纯的乙腈。
    可以尝试一下,

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  • Ins_f7ddbd9c

    第10楼2024/06/01

    缓冲盐是10mM碳酸氢铵,方法的话,我依据的是文献所述方法,文献所述用50-100%的乙腈,我们考虑到纯乙腈可能的盐析问题,稍微提高了水的比例,之前用该方法的话比较正常,大概用了2个月后就最近出现了该问题

    sdzb1982(sepu007) 发表:以我判断盐析的问题可能性最大,因为你低有机相时,是没有问题的,只有有机相达到90%,才出现这个问题。
    只是你盐析的不是很严重,没彻底堵死管路,只是少量盐晶颗粒,影响宝石球(宝石球由于盐晶颗粒的影响,不能完全和底座密封,就出有少量液体回流,所以就会出现压力波动。

    你这方法看起来是不像是标准方法,是自己开发的吗?能方便说一下是什么缓冲盐,浓度有多大吗?

    1、你可以适当降低盐的浓度。
    2、也可以在乙腈中加5%-10%的水,不要用纯的乙腈。
    可以尝试一下,

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