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【“仪”起享奥运】基于HPLC指纹图谱与一测多评法结合的桑黄品质评价方法
小卡
2024/08/07
私聊
中药/天然药检测
目的 基于HPLC特征图谱,建立同时测定桑黄中原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、紫萁酮和牛奶树碱5种成分含量的一测多评方法(quantitative analysis of multi-components with a single-marker, QAMS),对不同来源的桑黄药材进行品质评价研究。
方法 收集了3个种源地共10个批次的桑黄药材样品,采用Wondasil C18 Superb色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量 1.0 mL·min-1,柱温25 ℃,进样量20 μL,采用变波长程序,建立内参物原儿茶醛与原儿茶酸、咖啡酸、紫萁酮、牛奶树碱的相对校正因子并进行了相对校正因子的耐用性考察。采用外标法(external standard method, ESM)和QAMS法分别测定不同来源共10批桑黄药材中该5种成分的含量以验证QAMS法的准确性。
结果 采用SPSS与Origin Pro进行主成分分析、相似度分析和聚类分析。结果显示,5种成分专属性、精密度、重复性、稳定性、线性范围(
r
2>0.999 0)均良好、平均加样回收率99.74%~102.78%,RSD 1.34 %~2.92%。以原儿茶醛为内参物,原儿茶酸、咖啡酸、紫萁酮、牛奶树碱的平均相对校正因子分别为0.851 9、1.446 9、1.615 7、0.774 7;
t
检验结果表明,ESM法与QAMS法测定结果差异不显著。通过统计学分析实现了数据集的可视化,聚类分析发现西藏和广东产地的桑黄样品呈现一定的地域差异,但也发现了源于广东和长白山的个别桑黄样品与源于西藏的桑黄样品聚为一类的现象,意味着不能仅仅依据产地评价桑黄品质优劣,因为可能存在基源不清或品种混淆的状况。不同桑黄样品中牛奶树碱、原儿茶醛、紫萁酮的含量差异较大,且此3类成分对主成分的贡献较多,可能为桑黄的主要质量标志物。
结论 该研究基于HPLC指纹图谱建立的QAMS法简单、经济、实用,可以实现对桑黄中主要成分的快速、科学分析,也为其种质资源的品质评价提供了一定的科学依据。
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