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【“仪”起享奥运】UPLC-Q/TOF-MS研究掌叶大黄酒蒸前后的化学成分变化

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2024/08/08

中药/天然药检测

大黄Rhei Radix et Rhizoma是大宗饮片之一，来源于蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄R. tanguticum Maxim. ex Balf.和药用大黄R. officinale Baill.的干燥根或根茎。大黄主要含有多糖、鞣质、黄酮、二苯乙烯、苯丁酮、蒽醌、蒽酮、色原酮等成分，具有泻下攻积、清热泻火、凉血解毒、逐淤通经、利湿退黄等功效及抗炎、抗菌、抗癌、保肝、保护心脑血管、调节胃肠道等药理活性。大黄炮制方法主要有酒制、蒸制、炒炭、醋制等。

大黄炮制过程涉及添加辅料、加热等，炮制前后大黄各类成分发生变化，目前文献报道中大黄炮制前后化学成分的变化规律主要表现为炮制后没食子酸糖苷、儿茶素糖苷等鞣质类成分含量降低，虎杖苷、反-3,5,4′-三羟基苯乙烯基-4′-O-β-D-葡萄糖苷和反- 3,5,4′-三羟基苯乙烯基-4′-O-β-D-(6″-O-没食子酰基)葡萄糖苷等二苯乙烯类含量降低；对炮制前后的蒽醌类化合物含量进行统计，大黄中结合蒽醌在炮制后含量均降低，且熟大黄和大黄炭中结合性蒽醌含量与生品比较显著降低；游离蒽醌含量在炮制后较生品升高，表明加辅料、加热的过程可能促进了大黄多聚体化合物向次级聚体化合物转化、苷类向苷元转化。掌叶大黄是临床常用的大黄品种，掌叶大黄酒蒸后活血化瘀、抑制消化酶活性、抗炎、降低肝肾毒性能力增强，广泛运用于临床内科、妇科、儿科疾病的治疗及研究。

酒蒸掌叶大黄是1个加热的过程，之前的研究主要集中在大黄炮制前后个别成分变化，忽略了大黄整体成分炮制前后变化，所以使用UPLC-Q/TOF-MS技术结合植物代谢组学方法整体的研究掌叶大黄酒蒸前后的化学成分变化，深化大黄的炮制机制研究。超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱（UPLC-Q/TOF-MS）技术结合了超高效液相色谱仪的分离功能及飞行时间串联质谱对离子碎片质量的高分辨判别，可以对复杂化合物进行高效分离和定性鉴别。植物代谢组学方法可通过UPLC-Q/TOF-MS、¹H-NMR等分析植物小分子化学成分，运用主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）、模式识别等统计学方法研究中药化学成分炮制前后的变化规律，为深入中药炮制理论研究提供了新方法。掌叶大黄的炮制研究内容广泛，但运用植物代谢组学方法针对掌叶大黄的炮制前后的化学成分及化学成分变化研究缺乏，因此运用UPLC-Q/TOF-MS技术及植物代谢组学分析对掌叶大黄酒蒸前后的化学成分展开研究，以期得到掌叶大黄炮制前后的全成分及差异成分，促进掌叶大黄炮制机制分析的深入。

仪器：Waters Xevo G2-XS QTof质谱仪 [电喷雾电离源（ESI）]、数据处理软件Mass Lynx V 4.2（Waters公司）；Mettler MT5型电子分析天平（Mettler Toledo公司）；SK5200H型超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；YH－C1002电子天平（瑞安市英衡电器有限公司）；DZTW型调温电热套（北京市光明医疗仪器有限公司）；RE-5203型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；Milli-Q型超纯水净化系统（Millipore公司）。

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