仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
评论
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
食品检测
>
食品常规理化分析
>
帖子详情
【“仪”起享奥运】气相色谱法分析野生菱角壳中多糖化合物
小卡
2024/08/10
私聊
食品常规理化分析
1、引言
20世纪60年代以来,人们逐渐发现多糖具有复杂多样的生物活性和功能,如多糖有免疫调节功能可作为广谱免疫促进剂,作为药物可以治疗风湿病、慢性病毒性肝炎、癌症等;还具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂,促进核酸与蛋白质的生物合成等作用。菱,别名菱角、水菱角、风菱,为菱科菱属植物乌菱TrapabicomisOsbeck的种子,据文献记载,其果壳、果柄、果、茎及叶柄均可进药,有健胃止痢、抗癌等作用;还可用于治疗胃溃疡、痢疾、食道癌、子宫颈癌及乳腺癌等。
本研究首次从野生菱角壳中提取分离出多糖,并对多糖的单糖组成进行了深进的研究,为进一步开发和利用野生菱角资源提供了科学依据。
2、实验部分
2.1 样品、试剂与仪器市售的菱角往仁后,壳晒干,粉碎备用。单糖及双糖标准物质(半乳糖、阿拉伯糖、木糖、鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、乳糖和蜜二糖)均购自ChemService,纯度大于98%。所用化学试剂除甲醇和乙醇为色谱纯外,其余均为分析纯。UV-2501PC紫外光谱仪(日本岛津公司);NicoletMagna560傅里叶变换红外光谱仪(美国尼高力公司);VarianUnityPlus600核磁共振波谱仪(美国瓦里安公司);HP6890和HP5973
气相色谱
-质谱联用仪(美国安捷伦公司)。
2.2 实验方法
(1)多糖化合物的提取及纯化方法称取800g洗净晒干的菱角壳,加人1:1乙醇-乙醚混合液,65℃水浴回流1~3h往脂;残渣中加水,9O~100℃水浴提取4~6h,更换净水反复提取2~3次,合并深红色多糖提取液,过滤,浓缩。向提取液加人3/7倍体积的乙醇,离心分离沉淀,冻干得多糖粗品F1。向上清液中加人1.0倍体积的乙醇,离心分离沉淀,冻干得多糖粗品F2。依此方法,向上清液中先后加人1.5和4.0倍体积乙醇,分别得到多糖粗品F3和F4。。若直接向原多糖提取液中加人4倍体积的无水乙醇,则得到混合多糖粗品F5。用Sevag法除往多糖粗品中的蛋白质,H2O2法除往色素,透析72h后,浓缩,冻干,即得多糖纯品;
(2)多糖的水解取多糖样品10mg于安瓶中加人3moL/L三氟乙酸2mL,密封后在120℃恒温中水解6h,用氮气吹干三氟乙酸,加甲醇并吹干,水解产物加进0.6mL0.05mol/LNaOH溶液,再加5mgNaBH4,室温下反应8—10h,加少许乙酸分解过量的NaBH4,至无气泡产生为止。蒸干反应液,以酸性甲醇洗涤反应产物,蒸干甲醇液,重复3—4次以除往硼酸根,最后加进甲醇蒸干并于烘箱中105℃除净水分;
(3)乙酰化衍生法取水解得的单糖3mg,加进0.5mL吡啶,1mL乙酸酐,加热2h,冷却后加甲苯2mL,用N2吹干,加进氯仿,蒸馏水洗涤,用N2吹干得到棕黄色产物。此乙酰化的单糖醇用CHC13稀释后进行
气相色谱
-质谱分析;(4)三甲基硅烷化衍生法取水解得的单糖样品6mg,加吡啶0.6mL,六甲基四硅胺烷0.2mL,三甲基氯硅烷0.2mL,振荡,静置,取上清液进行
气相色谱
-质谱分析。
2.3
GC-MS
分析条件HP-5石英毛细管色谱柱(美国安捷伦公司),(50m×0.22mmi。d。,0.25μm);EI源,电子能量70eV,分子量扫描范围33—550,进样口温度260℃,接口温度270℃,载气氦气流速1.2mL/min,分流比20:1, 程序升温:100℃→1O℃/min150℃→15℃/min260℃(40min).
3、结果与讨论
3.1 菱角壳提取物中多糖的鉴定分析Molisch实验:硫酸和多糖溶液分为两层,层与层之间有紫色环出现。说明提取物确含糖。混合多糖F5纯品的FT-IR谱图。谱图中多处可见到多糖的特征峰,如:3435/cm,2924/cm的吸收峰分别为O—H,C—H的伸缩振动峰,1193/cm,1037/cm处的吸收峰是多糖中C—O,C—O—C伸缩振动和C—OH的弯曲振动特征峰,在1000—700/cm的吸收峰则是α-和β-吡喃单糖形成的特征。
混合多糖F5纯品的HNMR谱图。谱图中δ3.5—δ5.5之间可见多个糖质子的响应信号峰,其中δ4.605、δ4.7和δ4.9223个峰是β-吡喃环上的质子信号,而δ5.238、δ5.348、δ5.446、δ5.465和δ5.515则可能来自于α-吡喃环上的质子,由此可见,此多糖可能是由多种单糖组成。
3.2 菱角壳多糖中单糖组成的确定样品F1一F4水解产物的乙酰化衍生物经
气相色谱
-质谱分析,通过与标准色谱图对照比较和质谱碎片解析,确定了其单糖组成及摩尔比。数据表明,4种多糖分别由不同摩尔比的几种单糖(如阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖)和二糖(乳糖、蜜二糖)组成,其中多糖F2一F4的单糖组成相同,只是摩尔比略有不同;而F1则由5种单糖和2种二糖组成。葡萄糖,半乳糖和甘露糖在4种多糖中占的比例较大,是菱角多糖的主要成分。
混合多糖样品F5的甲基硅烷化衍生物的
GC-MS
,经碎片分析并利用标准质谱NIST库进行检索,l1个色谱峰被确以为单糖的甲基硅烷化衍生物。由于在衍生化过程中α型和β型吡喃和呋喃异构体的天生,同一单糖可以天生几种衍生物。因此,只检出5种单糖,其中包括两种戊糖(阿拉伯糖和木糖),3种己糖(甘露糖,半乳糖和葡萄糖)。从峰面积百分比数据还可以看出,葡萄糖、半乳糖、木糖和甘露糖在该混合多糖中所占的比例较大,是菱角多糖的主要成分,这与乙酰化分析的结果基本一致。
相关话题
1
【“仪”起享奥运】蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
2
【“仪”起享奥运】高效液相色谱仪直接分析氨基酸物质
3
【“仪”起享奥运】苯酚法测定可溶性糖
4
【“仪”起享奥运】植物可溶性糖含量的测定
5
【“仪”起享奥运】牛乳中蛋白质的提取与鉴定
近期热榜
【官方邀请】高效液相色谱使用情况有奖调研
【中秋佳节】 在一起月更圆!
一个“不符合”难住新领导
第三届微课大赛投票进行中ing
热门活动
第三届微课大赛投票进行中ing
【仪采通】仪器采购更轻松
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
【讨论】有哪些食品是目前不能检测的,你知道多少?
2010/01/20
mvr蒸发浓缩糖结了一层垢
已应助
2023/11/21
常规理化
已应助
2020/07/01
罗伟鹏比色计操作视频
求助
2012/01/13
食品中总酸的测定(酱油)
第六届原创
2013/12/19
【资料】粪链球菌及检验
2006/09/25
【讨论】葡萄酒化验酒精度应该与精度多少的恒温水浴相匹配
2009/10/02
培养基复溶
已应助
2022/05/20
二硫化碳的测定曲线怎么做的二乙胺法求大佬指点
讨论
2024/09/14
【金秋计划】样品分离技术都有哪几种
分享
2024/09/13
【金秋计划】分光光度计的吸光度,为何要控制在1以内
分享
2024/09/13
【金秋计划】如何确保你的pH测量始终处于良好状态
分享
2024/09/13
【金秋计划】农残检测前处理方法你选对了吗
分享
2024/09/13
【金秋计划】如何搞定食品留样问题
分享
2024/09/13
【金秋计划】认可与检验检测监督管理司关于实验室一些典型问题的权威回复
分享
2024/09/12
【金秋计划】无菌室的洁净度检测方法与步骤
分享
2024/09/12
【金秋计划】当没有合适的基质时可以用标准加入法来试试看
第十七届原创
2024/09/13
原子吸收火焰法测定土壤中六价铬所用质控样值一直在衰减
求助
2024/09/12
关气瓶是先关总阀还是先关减压阀?
求助
2024/09/14
基线(随机出现)突跃有哪些原因?
求助
2024/09/12
数据和结果
求助
2024/09/11
液质有什么好项目可以做
讨论
2024/09/11
委托加工,条形码到底该用谁的?
求助
2024/09/13
恒温振荡器如何校准?
已应助
2024/09/13
【“仪”起享奥运】还原糖和总糖的测定3,5-二硝基水杨酸比色法
分享
2024/08/10
【“仪”起享奥运】蔬果中维生素C含量的检测方法
分享
2024/08/10
【“仪”起享奥运】油脂在贮藏加工过程中的变化
分享
2024/08/10
【“仪”起享奥运】色谱定量方法:标准加入法&内标法&外标法!
分享
2024/08/10
【“仪”起享奥运】一文讲清楚样品称量不精准的4大原因~
分享
2024/08/10
【“仪”起享奥运】如何设计原始记录表格?检测原始记录的基本要求和模板
分享
2024/08/10
【“仪”起享奥运】赶紧收藏!药品试剂的管理大总结!
分享
2024/08/10
【“仪”起享奥运】试剂干燥方法及干燥剂真的了解么,不是那么简单的!
分享
2024/08/10
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...