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【金秋计划】黄芪甲苷IV通过减少细胞外囊泡释放和抑制M2型TAMs激活抑制结直肠癌转移
城头变幻大王骑
2024/09/02
私聊
中药/天然药检测
背景
肿瘤源性
细胞外囊泡(TEVs)
已被证实通过重塑
肿瘤微环境(TME)
促进
结直肠癌
(CRC)转移
。药物靶向TEVs被认为是一种很有前途的癌症治疗策略。
中医药
在改善结直肠癌患者的预后,最终使结直肠癌患者发生远处转移方面起着至关重要的作用。虽然中药处方中活性化合物的抗肿瘤作用已被广泛观察到,但其分子机制尚不清楚。
目的
该研究旨在探讨中药文库中有效化合物对结直肠
癌转移
的预防作用,并从TEVs的角度探讨其潜在机制。
方法
采用CCK-8法观察活性化合物对结直肠
癌细胞
增殖的影响。采用超离心方法从MC38细胞中提取TEVs,并用电镜、Nanosight NS300和western blotting对TEVs进行表征。采用Nanosight NS300对TEV粒子进行定量。western blotting分析
黄芪甲苷IV(ASIV)
降低TEV分泌的可能机制。
RAW264.7细胞与MC38细胞的条件培养基(CM)共培养,通过
免疫
荧光和定量聚合酶链反应(q
PCR
)评估肿瘤相关
巨噬细胞(TAMs)
的活化情况。采用创面愈合和Transwell实验检测结直肠癌细胞的迁移。采用结直肠癌脾-肝转移模型,在体内验证ASIV的有效性。采用小鼠
肝转移
瘤进行肝重测定和H&E染色。采用免疫荧光法观察TAMs的浸润、中性鞘磷脂酶2 (nSMase2)和Rab27a的表达。
结果
通过对中药单体文库的筛选,发现主要
从黄芪中提取的ASIV以时间和浓度依赖性的方式减少结直肠癌细胞TEV的释放
。在机制上,ASIV通过下调CRC细胞中nSMase2和Rab27a的表达来抑制TEV的产生和分泌。来自ASIV处理的CRC细胞的CM通过
减少M2型极化,增加M1型极化来重塑TAMs的极化
。
因此,M2型巨噬细胞向M1型巨噬细胞的再极化导致CRC细胞的侵袭和迁移减少。此外,证实
ASIV抑制结直肠癌肝转移,减少M2型巨噬细胞浸润,降低肝转移中nSMase2和Rab27a的表达
。
结论
ASIV通过减少EVs释放和抑制M2型TAMs激活来抑制结直肠癌转移
。所有这些发现揭示了ASIV在预防结直肠癌进展中的机制,并为抗
肿瘤治疗
提供了一种有希望的方法。
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