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【金秋计划】瓜蒌薤白药对通过调节Nrf2介导的铁死亡,改善小鼠动脉粥样硬化及HUVECs损伤
城头变幻大王骑
2024/09/04
私聊
中药/天然药检测
动脉粥样硬化(AS)
是一种以
内皮
损伤引起的动脉壁炎症和脂质沉积为特征的慢性
血管
疾病。
铁死亡
是一种新的细胞死亡类型,内皮性铁死亡是AS进展的重要因素。
瓜蒌薤白(GLXB)
是一种著名的
中药药对
,对治疗AS有重要作用。然而,GLXB是否通过
抑制内皮细胞铁死亡
而发挥抗动脉粥样硬化作用的潜在机制尚未确定。
探讨GLXB对AS内皮细胞铁死亡的影响及其作用机制。
在ApoE?/?小鼠中,用
高脂饮食(HFD)喂养12周
的小鼠进行超声检查,以评估AS的建立是否成功。然后,用GLXB和辛伐他汀(阳性对照)治疗ApoE?/?小鼠4周。通过
主动脉
显像和苏木精-伊红(HE)染色评估GLXB对AS病理的影响。
为了证实铁死亡的存在,通过透射电子显微镜(TEM)观察
线粒体损伤
,并分析游离铁和脂质过氧化水平。体外实验:ox-LDL诱导的
人血管内皮细胞(HUVECs)损伤
,用GLXB、
铁死亡诱导剂Erastin
和
Nrf2抑制剂ML385
处理。采用CCK-8法测定各组细胞活力。流式细胞术检测脂质过氧化和细胞内亚铁水平。
免疫
荧光染色显微镜证实Nrf2核易位。Western blot检测蛋白表达。
GLXB改善了动脉粥样硬化性病变和血管斑块
。GLXB通过降低炎症因子和粘附因子的水平以及减少内皮细胞的脱落来抑制主动脉内皮损伤。GLXB通过减轻ECs线粒体损伤,增加主动脉组织谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,下调过氧化脂质(LPO)和丙二醛(MDA)水平,抑制ApoE?/?小鼠的铁死亡。
有趣的是,Erastin被用于在体外证明GLXB抑制铁死亡可以减弱ox-LDL诱导的HUVECs损伤作用,而这种作用被Erastin逆转。机制上,
GLXB通过增加下游抗铁死亡靶蛋白,促进Nrf2与SLC7A11的相互作用,激活Nrf2信号通路抑制铁死亡
。更令人信服的是,ML385 (Nrf2抑制剂)逆转了GLXB的抗铁死亡作用。
结论
GLXB通过激活Nrf2信号通路抑制铁死亡介导的内皮细胞损伤,进一步减轻AS病理损伤
。
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